產(chǎn)品索引 | 5859 |
中文名稱: | 血液DNA提取試劑盒 |
英文名稱: | 血液DNAout |
產(chǎn)品編號: | 3671 |
產(chǎn)品類別: |
分子生物學(xué) |
生產(chǎn)廠家: | 國產(chǎn) |
產(chǎn)品價格: | 90元 |
產(chǎn)品規(guī)格: | 10 次(簡裝) |
產(chǎn)品介紹:
本產(chǎn)品用于提取新鮮或冷凍的動物(包括禽類)及人抗凝全血基因組DNA。
性能指標(biāo):
1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質(zhì)和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。DNA產(chǎn)量為30-50 ml/mL全血。
2.操作簡單,整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理。血液處理量可達(dá)1 mL,不需要柱子,不會發(fā)生其他同類產(chǎn)品經(jīng)常發(fā)生的堵塞現(xiàn)象。
3.價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格只有其一半左右。
4.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
使用方法:
將20-200 mg克剪碎的組織或0.1-1 ml血液直接加到0.75 ml溶液A中短暫勻漿,65℃保溫5分鐘后15000 g離心1分鐘,上清尤氳忍寤?芤?SPAN lang=EN-US>B混勻, 冰浴2分鐘,15000 g離心1分鐘,上清加入等體積的氯仿(自備)混勻后15000 g離心5分鐘,最后用等體積異丙醇沉淀上清得到DNA沉淀,用1 ml 75%乙醇(自備)清洗2次后將沉淀溶于緩沖液中待用。
實驗數(shù)據(jù):
圖一:血液DNAOUT效果圖
圖注:用本產(chǎn)品提取1 ml兔全血(左圖)和0.1 ml抗凝雞全血(抗凝劑:血液=1:1)得到的DNA(中圖),得到的DNA分別溶于50 ml和250 ml TE后取10 ml上樣,在0.8%瓊脂糖凝膠和1 X SuperBuffer中300 V電泳10分鐘后直接在UV燈下照相。M為全長l 嗜菌體DNA。按國內(nèi)某試劑盒提取方法提取0.2 ml雞血,柱子在離心后被堵, 實驗失敗(右圖)。
|
表一: 血液DNAOUT與國內(nèi)某試劑盒提取血液DNA數(shù)據(jù)比較
|
260/280
|
產(chǎn)率
|
兔全血
|
1.61(3)
|
16.58(3)
|
雞全血
|
1.82(3)
|
626.8(3)
|
鴨全血
|
1.83(3)
|
948.71(3)
|
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品:
微量DNA助沉劑DNAdown
非凍型DNA組織保存液:DNALOCKER
超快DNA電泳緩沖液:SuperBuffer
血液DNAOUT 提取試劑盒使用說明
一: 血液DNAOUT 提取試劑盒簡介
適用對象 新鮮或冷凍的動物及人抗凝全血基因組DNA的提取。
作用原理 所含去污劑裂解細(xì)胞并釋放出DNA,所含DNase抑制劑能抑制DNase的活性,所含去蛋白劑能清除血液細(xì)胞中所含的蛋白質(zhì)成份。所含RNase能去除RNA的污染。
試劑盒成份 “溶液A”,“溶液B”和“溶液C”。
性能指標(biāo) DNA產(chǎn)量與國內(nèi)同類產(chǎn)品相當(dāng)。
使用優(yōu)點(diǎn) 操作簡單 整個過程約15分鐘,室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理。
DNA純凈 獲得的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
價廉物美 與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格便宜一半左右。
安全無毒 本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
物理特性 2-8℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑 氯仿,異丙醇,75%乙醇。
二: 血液DNAOUT的使用
1. 在1ml抗凝全血中加入0.5ml“溶液A”(冷凍血需先37℃水浴融化),吹打混勻。
2. 室溫離心15000rpm,2分鐘,沉淀呈紅色。小心傾去上清。
3. 再加入1ml“溶液A”,輕柔的吹打混勻,使細(xì)胞完全分散。
4. 室溫離心15000rpm, 2分鐘,沉淀呈粉白色。傾去上清。
5. 加入0.6ml“溶液B”(用前搖勻),用1ml吸頭徹底吹打混勻。
6. 68℃水浴10分鐘(此步可省略,但產(chǎn)量略有降低)。
7. 加入0.2ml氯仿和0.3ml“溶液C”,立即小心的顛倒混勻。
8. 室溫離心15000rpm,3分鐘,小心將上清(約0.7ml)轉(zhuǎn)移至一新的離心管中,加入等體積異丙醇,輕柔的顛倒混勻5-8次,此時出現(xiàn)絮狀DNA沉淀。
9. 室溫離心15000rpm,1分鐘,去盡上清。
10. 加入75%乙醇洗滌沉淀,室溫離心15000rpm,1分鐘。
11. 重復(fù)步驟10。
12. 室溫干燥DNA沉淀10分鐘,加入TE緩沖液0.1-0.3ml。65℃水浴10分鐘溶解DNA,中速振蕩5秒混勻。