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3M霉菌和酵母菌檢驗(yàn)測(cè)試片操作以及判讀 |
| 一、測(cè)試霉菌和酵母菌 操作方法 | |
 1、未開(kāi)封時(shí)，冷藏于≤8℃（≤46℉），并在保存期內(nèi)用完，高溫度時(shí)，凝固水可以排除，包裝物最好于室溫啟開(kāi)。 |
 2、已開(kāi)封的，將封口以膠帶封緊。 |
 3、保存再封的袋于≤25℃（≤77℉）和溫度<50％，不要冷藏已開(kāi)啟的包裝袋，并于一個(gè)月內(nèi)使用完。 |
 4、制備1：10和更大稀釋的食物樣品稀釋液，稱取或吸取食物樣品，置入適宜的無(wú)菌容器內(nèi)，如均質(zhì)袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內(nèi)。 |
 5、加入適量的無(wú)菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調(diào)PH7.2) 、0.1%的旦白膠水(ISO方法6887) 、緩沖旦白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水。不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液，因?yàn)樗鼈兡芤种咕L(zhǎng)。 |
樣品不需要調(diào)PH，但已調(diào)解PH的樣品也能夠使用。 |
 7、將測(cè)試片置于平坦表面處，揭開(kāi)上層膜。 |
 8、使用吸管將1ml樣液垂直滴加在測(cè)試片的中央處。 |
 9、允許使上層膜直接落下,切勿向下滾動(dòng)上層膜. |
 10、手拿壓板橫膜,將壓板放置在上層膜中央處. |
 11、平穩(wěn)的壓下，使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上，切勿扭轉(zhuǎn)壓板。 |
 12、拿起壓板，靜置至少1分鐘以使培養(yǎng)基凝固。 |
 13、測(cè)試片的透明面朝上，可堆疊至20片，于21-25℃（70-77℉）培養(yǎng)3-5天。大的或快速生長(zhǎng)的霉菌在培養(yǎng)5天后會(huì)呈現(xiàn)含混模糊的菌落，應(yīng)在培養(yǎng)3天后記錄高數(shù)量計(jì)數(shù)結(jié)果。 如果培養(yǎng)5天后，測(cè)試片上菌落叢生過(guò)快的生長(zhǎng)，則以3天計(jì)數(shù)結(jié)果作為估計(jì)菌落數(shù)。培養(yǎng)時(shí)間和溫度因方法而有不同，最通用的認(rèn)可方法是： AOAC官方方法997.02 （食品類） 21-25℃培養(yǎng)5天。 |
 14、可目視及用標(biāo)準(zhǔn)菌落計(jì)數(shù)器或其它的照明放大鏡計(jì)數(shù)，并可參考判讀卡計(jì)算菌落數(shù)。 |
| 二、測(cè)試霉菌和酵母菌 判讀方法 | |
| Petrifilm and Mold count MoldTM測(cè)試片為預(yù)先制備好的培養(yǎng)基系統(tǒng),它含有一種冷水可溶性的凝膠劑，營(yíng)養(yǎng)基和一種指示染劑，可提供對(duì)比，利于菌落計(jì)數(shù)。 | |
 Yeasr count=44圖1為酵母菌菌落特征：
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 Mold count=27圖2為酶菌菌落特征：
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 Years and mold count=0圖3所示在PYM測(cè)試片上沒(méi)有霉菌和酵母菌菌落. |
 Yeast count=12Mold count=4 圖4所示在PYM測(cè)試片上有少數(shù)量的霉菌和酵母菌菌落. |
 Estimated yeast count=480Mold count=21 圓形的生長(zhǎng)區(qū)大約為30cm2,當(dāng)菌落數(shù)超過(guò)150個(gè)為估計(jì)菌落數(shù),可選擇其中一個(gè)或幾個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2 ),計(jì)算平均菌落數(shù)在乘以30,可得到整個(gè)測(cè)試片上的估計(jì)菌落數(shù). |
 Yeast count=TNTC (實(shí)際菌數(shù)>104)圖6所示在PYM測(cè)試片邊緣框里光亮區(qū)的的小型.蘭色菌落同樣也分布在整個(gè)測(cè)試片中(盡管有較小的可見(jiàn)度),這是膠木菌菌落太多無(wú)法計(jì)數(shù)(TNTC)現(xiàn)象. |
 Mold count=59圖7所示,在測(cè)試片上霉菌菌落出現(xiàn)堆擠和彼此覆蓋,為了方便計(jì)數(shù),可將測(cè)試片分成幾個(gè)區(qū)域,計(jì)算每個(gè)有明顯暗色中心的菌落.所劃的方形區(qū)內(nèi)有15個(gè)霉菌菌落。 |
 Mold count=TNTC 圖8a和圖8b為同一樣品的測(cè)試結(jié)果.圖8a為1:10樣品稀釋液,菌落小、虛弱暗淡、數(shù)量多、計(jì)數(shù)困難。圖8b為1：100樣品稀釋液，生長(zhǎng)菌落數(shù)在適宜范圍（15-150個(gè)）內(nèi)，很容易計(jì)數(shù)。 |
 Yesat and Mold Count=0 |
 yesat and Mold Count=0 |
6、攪拌或均質(zhì)樣品.
