由于實(shí)質(zhì)細(xì)胞比非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的平均體積大10倍左右,所以采用差速離心可以從肝細(xì)胞懸浮液中分離出肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞,但離心條件應(yīng)嚴(yán)格控制。
一般在4℃,低速離心(大約50g)15min就可使實(shí)質(zhì)細(xì)胞沉降到管底,通過反復(fù)洗沉淀再離心可以提高實(shí)質(zhì)細(xì)胞的純度。
如果離心力稍微增加,就會(huì)使非實(shí)質(zhì)細(xì)胞大量沉降到沉淀里。
在550g離心5min,可以回收非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,它不含實(shí)質(zhì)肝細(xì)胞。
由于解離出的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞容易凝聚,該法會(huì)丟失大量非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,其中枯否氏細(xì)胞丟失15%~30%。