1.什么是高通量測序？

高通量測序技術(shù)（High-throughput sequencing，HTS）是對傳統(tǒng)Sanger測序（稱為一代測序技術(shù)）的改變, 一次對幾十萬到幾百萬條核酸分子進(jìn)行序列測定, 因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序技術(shù)(next generation sequencing，NGS )足見其劃時代的改變, 同時高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能, 所以又被稱為深度測序(Deep sequencing)。

2.什么是Sanger法測序（一代測序）

Sanger 法測序利用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應(yīng)構(gòu)成，每個反應(yīng)含有所 有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團，使延長的寡 聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點由反應(yīng)中相應(yīng)的雙脫氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調(diào)整，使反應(yīng)得到一組長幾百至 幾千堿基的鏈終止產(chǎn)物。它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上，可通過高分辨率變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理后可用X-光膠片放射 自顯影或非同位素標(biāo)記進(jìn)行檢測。

3.什么是基因組重測序（Genome Re-sequencing）

全基因組重測序是對基因組序列已知的個體進(jìn)行基因組測序，并在個體或群體水平上進(jìn)行差異性分析的方法。隨著基因組測序成本的不斷降低，人類疾病的致病突變研 究由外顯子區(qū)域擴大到全基因組范圍。通過構(gòu)建不同長度的插入片段文庫和短序列、雙末端測序相結(jié)合的策略進(jìn)行高通量測序，實現(xiàn)在全基因組水平上檢測疾病關(guān)聯(lián) 的常見、低頻、甚至是罕見的突變位點，以及結(jié)構(gòu)變異等，具有重大的科研和產(chǎn)業(yè)價值。

4.什么是de novo測序

de novo測序也稱為從頭測序：其不需要任何現(xiàn)有的序列資料就可以對某個物種進(jìn)行測序，利用生物信息學(xué)分析手段對序列進(jìn)行拼接，組裝，從而獲得該物種的基因 組圖譜。獲得一個物種的全基因組序列是加快對此物種了解的重要捷徑。隨著新一代測序技術(shù)的飛速發(fā)展，基因組測序所需的成本和時間較傳統(tǒng)技術(shù)都大大降低，大 規(guī)�；�因組測序漸入佳境，基因組學(xué)研究也迎來新的發(fā)展契機和突破。利用新一代高通量、高效率測序技術(shù)以及強大的生物信息分析能力，可以高效、低成本 地測定并分析所有生物的基因組序列。