1.波長準(zhǔn)確度的檢驗：

分光光度計在使用過程中，由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進行檢驗。

檢驗波長準(zhǔn)確度最簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值, 如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定，則需要進行波長調(diào)節(jié)。

2.透射比正確度的檢驗：

用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。

3.穩(wěn)定度的檢驗：

在零點不受光的條件下，用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至100%）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。 

4.光的檢驗：

可見分光計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。

使用分光光度計的步驟與方法

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• 預(yù)熱儀器：

為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。

• 選定波長：

根據(jù)實驗要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。

• 固定靈敏度檔：

根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。

• 調(diào)節(jié)“0”點：

輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。

• 調(diào)節(jié)T=100%：

將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。

• 測定：

輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針?biāo)�示為該有色溶液的吸光度A，讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。

• 關(guān)機：

實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

使用分光光度計都有什么注意事項？

1）為了防止光電管疲勞：

不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長光電管使用壽命。

2）比色皿的使用方法：

①拿比色皿時：

手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

②清洗比色皿時：

一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如，比色皿被有機物沾污，可用鹽酸－乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實驗時，應(yīng)立即洗凈比色皿。

③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干：

以保護透光面。

④測定有色溶液吸光度時：

一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。

⑤在實際分析工作中：

通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。

分光光度計的維護和保養(yǎng)

分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度有重要作用。

1.對儀器工作環(huán)境的要求

分光光度計應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺上，(周圍不應(yīng)有強磁場, 以防電磁干擾)，室內(nèi)溫度應(yīng)保持在(10～30)℃。室內(nèi)應(yīng)干燥，相對濕度宜控制在<85 %，室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體，光線不宜過強。

2.儀器保養(yǎng)和維護方法

(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10 %的電壓波動。為保持光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性，在電源電壓波動較大的實驗室最好配備穩(wěn)壓器。

(2)為了延長光源使用壽命，在不用時不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。

(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開，為防止色散元件受潮發(fā)霉，必須經(jīng)常更換干燥劑。

(4)必須正確使用吸收池，保護吸收池光學(xué)面。

(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間曝光，應(yīng)避免強光照射或受潮積塵。