常見的分析方法中,峰面積定量是首選的。原則上講,峰面積是兩維的數(shù)據(jù),比峰高包含有更多的信息,用來定量更加可靠。實驗中不管峰形如何(高斯峰或者非高斯峰),峰面積和樣品量存在線性關(guān)系。
峰高是可以用來定量的,但一般情況下,相對于采用峰面積定量采用峰高定量的線性范圍比較窄。
我們在檢索比較傳統(tǒng)的分析文獻時,經(jīng)常能見到使用峰高定量的場合,尤其是使用TCD或ECD檢測器的分析方法。
主要原因有兩個:
1.TCD是濃度性檢測器,分析環(huán)境的不穩(wěn)定(例如柱流量)對色譜峰高的影響比峰面積為小。
2.色譜記錄條件的限制
傳統(tǒng)的記錄儀或者積分儀得到的譜圖,需要手工測量峰高或者峰面積。測量峰高只需要用到刻度為mm級別的直尺,測量峰面積則另外需要讀數(shù)顯微鏡來確定峰寬,另外還需要考慮峰是否對稱、基線是否漂移等諸多因素,顯然峰高的測定比峰面積要容易和準確的多。尤其是保留時間短、峰寬較小的組分,手工測定峰面積是比較困難的。
現(xiàn)在實驗室基本采用色譜數(shù)據(jù)工作站的方法來測量色譜峰,那么色譜記錄條件的不再成為限制,目前我們看到的分析方法,就比較少采用峰高定量了。
另外:
如果相鄰的兩個或多個色譜峰分離度較低,用峰高定量會更加準確。
如果色譜峰信噪比較低,由于基線位置不容易確定的原因,用峰高定量會更加準確。
如果色譜峰對稱性較差,用峰面積定量更加準確。