01

 玻璃儀器 

正確的使用各種玻璃儀器對于減少人員傷害事故及保證實驗室的安全是非常重要的。實驗室中不允許使用破損的玻璃儀器。對于不能修復的玻璃儀器，應當按照廢物處理。在修復玻璃儀器前應清除其中所殘留的化學藥品。實驗室人員在使用各種玻璃器皿時，應注意以下事項：

（1）在橡皮塞或橡皮管上安裝玻璃管時，應戴防護手套。先將玻璃管的兩端用火燒光滑，并用水或油脂涂在接口處作潤滑劑。對粘結(jié)在一起的玻璃儀器，不要試圖用力拉，以免傷手。

（2）破碎玻璃應放入利器盒（供應室可領(lǐng)利器盒）處理。較大的破碎玻璃應放入專門的加厚箱子，并封裝好，貼明警示標識，等待學院處理。破碎玻璃在放入垃圾桶前，應用水沖洗干凈。

（3）不要將加熱的器皿放在過冷的臺面上，以防止溫度急劇變化而引起玻璃儀器破碎。

 

 

02

 

 生物安全柜 

 

1、應參考國家標準和相關(guān)文獻，對所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性。應當發(fā)給工作人員書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊。特別需要明確的是，當出現(xiàn)溢出﹑破損或不良操作時，安全柜就不再能保護操作者。

2、生物安全柜運行正常時才能使用。

3、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。

4、安全柜內(nèi)應盡量少放置器材或標本，不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán)。

5、安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)。

6、所有工作必須在工作臺面的中后部進行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。

7、盡量減少操作者身后的人員活動。

8、操作者不應反復移出和伸進手臂以免干擾氣流。

9、不要使實驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，因為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。

10、工作完成后以及每天下班前，應使用適當?shù)南�毒劑對生物安全柜的表面進行擦拭。

11、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風機應至少運行5min。

12、在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進行文字工作。

13、通過在生物安全柜內(nèi)人工產(chǎn)生微生物（枯草桿菌芽孢） ，在生物安全柜外用培養(yǎng)皿采集枯草桿菌芽孢判定生物安全柜對工作人員的防護能力。

 

03

 

 

 超凈臺 

 

 

1、使用前15-20分鐘用75%酒精擦拭工作臺面，將實驗所需的物品放于臺面中間工作區(qū)的兩側(cè)，使用的移液器吸頭、試管、培養(yǎng)皿等均事先滅菌。

2、使用前15-20分鐘開紫外燈，對工作區(qū)域進行照射殺菌，將細菌、病毒全部殺死。為避免物品過多而導致紫外滅菌不徹底，臺面平時只需放移液器、75%酒精噴壺、75%酒精棉、接種器、酒精燈、記號筆和打火機等。

3、使用前10分鐘將通風機啟動，以排除臭氧等有害氣體。

4、操作時將照明燈開關(guān)打開，關(guān)掉殺菌燈。

5、操作前用75%酒精棉擦洗雙手和前臂。任何進入超凈臺的物品都必須經(jīng)過75%酒精擦拭后才可進入超凈臺。

6、工作臺面不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。打開各種瓶蓋前先過火，以固定灰塵，打開的瓶口、試管口過火，鑷子、接種器使用前應經(jīng)火灼燒以再除菌。

7、不要在工作臺面上記錄，工作時應盡量避免明顯擾亂氣流的動作。

8、工作完畢后，也必須以75%酒精擦拭臺面，并且將使用過的器具材料歸定位,垃圾清理干凈,停止風機運行，關(guān)掉照明燈，將上述不屬于超凈臺面的個人物品拿走。

9、操作員需嚴格按照上述規(guī)程實驗，使用移液器時用酒精棉擦拭移液器頭。吸頭等用前需用報紙包好并滅菌，且僅限個人使用。

10、為配合發(fā)酵工作，避免染菌，超凈臺周圍需定期進行打掃并消毒。用福爾馬林（40%甲醛）加少量高錳酸鉀定期對房間進行密閉熏蒸。

   注：超凈臺進風口的背面或正面的下方，金屬網(wǎng)罩內(nèi)有一普通泡沫塑料片或無紡布，用以阻擋大顆粒塵埃，應常檢查、拆洗，如發(fā)現(xiàn)泡沫塑料老化，要及時更換。工作臺面正面的金屬網(wǎng)罩內(nèi)是超級濾清器，超級濾清器也可更換，如因使用年久，塵粒堵塞，風速減小，不能保證無菌操作時，則可換上新的。

 

04

 

 

 

 培養(yǎng)箱

 

 

 

培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的主要設備，可用于細菌、細胞的培養(yǎng)繁殖。其原理是應用人工的方法在培養(yǎng)箱內(nèi)造成微生物和細胞、細菌生長繁殖的人工環(huán)境，如控制一定的溫度、濕度、氣體等。培養(yǎng)箱使用過程整體要注意以下幾點：

1、培養(yǎng)箱應放置在清潔整齊、干燥通風的工作間內(nèi)，箱內(nèi)的培養(yǎng)物不宜放置過擠，之間應保持適當間隔，以利冷（熱）空氣的對流循環(huán)。無論放入或取出物品應隨手關(guān)門，以免溫度波動。

2、帶有制冷壓縮機的要遵守冰箱保養(yǎng)的注意事項，如保持電壓穩(wěn)定、不要過度傾斜、不要短時間內(nèi)反復開關(guān)儀器、及時清掃散熱器上的灰塵等。

3、隔水式培養(yǎng)箱應注意先加水再通電，同時應經(jīng)常檢查水位，及時添加水。

4、開關(guān)細胞培養(yǎng)箱要小心，培養(yǎng)箱打開后要盡快關(guān)上，先要扭緊玻璃門，再關(guān)上培養(yǎng)箱門。培養(yǎng)箱鐵架子和盛水托盤要定時高壓滅菌處理。隨時留意最底層的盛水托盤,必要時補充高壓滅菌水。隨時留意細胞培養(yǎng)箱二氧化碳濃度,必要時立即更換二氧化碳鋼瓶。

 

05

 

 

 

 

搖床

 

 

 

 

1、電源必須有可靠的保護接地線，禁止非專業(yè)人員拆卸電器控制部分。

2、儀器長時間低溫運行時，要注意除霜或按期做加熱驅(qū)潮處理。

3、搖床高速旋轉(zhuǎn)工作時，為避免儀器產(chǎn)生大的振動，所占的培養(yǎng)試劑瓶應在搖臺上對稱放置，各瓶的培養(yǎng)液應大致相等。

4、儀器長期不用時，特別是在雨季或潮濕季節(jié)，應定期通電運行5-8h以驅(qū)除設備電氣元件吸附的水分。

5、帶有制冷壓縮機的要遵守冰箱保養(yǎng)的注意事項，如保持電壓穩(wěn)定、不要過度傾斜、不要短時間內(nèi)反復開關(guān)儀器、及時清掃散熱器上的灰塵等。

6、務必將東西放牢，并在啟動前確認別人的東西已經(jīng)放牢。

7、一定要在搖床開啟直至生至最大轉(zhuǎn)速后，搖床運行平穩(wěn)后才能離開。

8、若不慎將液體灑出，一定要將其擦干凈，防止滋生雜菌。

9、若有東西掉入機芯或卡在搖板底下無法清理，請關(guān)閉搖床轉(zhuǎn)移所有培養(yǎng)物，并第一時間告知負責人。嚴禁帶故障運行。

 

06

 

 

 

 

 

移液器

 

 

 

 

 

移液器操作規(guī)范和使用注意事項：

　　1、設定移液體積

　　從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可；從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，應先調(diào)至超過設定體積刻度，再回調(diào)至設定體積，這樣可以保證移液器的精確度。

　　2、裝配移液槍頭

　　將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣操作回導致移液器的零件因撞擊而松散，嚴重會導致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住搜索。

　　3、吸液及放液

　　垂直吸液，吸頭尖端浸入液面3mm以下，吸液前槍頭先在液體中預潤洗；慢吸慢放，放液時如果量很小則應吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。

　　4、吸有液體的移液槍不應平放，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導致槍的彈簧生銹。

　　5、移液槍在每次實驗后應將刻度調(diào)至最大，讓彈簧回復原型以延長移液槍的使用壽命。

　　6、吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。

　　7、為獲得較高的精度，吸頭需預先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時，吸頭內(nèi)壁會殘留一層”液膜”，造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。

　　8、濃度和粘度大的液體，會產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。

　　9、可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法，來校正取液器，1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。

　　10、在設置量程時，請注意旋轉(zhuǎn)到所需量程，數(shù)字清清楚楚在顯示窗中，所設量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程，否則會卡住機械裝置，損壞了移液器。

　　11、移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機物等）。

　　12、不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準確度。同時，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請使用移液管進行操作。

移液器的校準方法：

　　1、準備超純水、萬分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之一的天平）、溫濕度計、恒溫室，還需準備一個小口容器，防止水分揮發(fā)。

　　2、按移液器總量程的100%、50%、10%分別進行第三和第四步。

　　3、吸頭要反復吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數(shù)據(jù)穩(wěn)定讀取天平數(shù)值，同時記錄溫度。重復10次。

　　4、將測量的數(shù)據(jù)用iso8655中的計算公式計算獲得對應溫度下的體積，取平均值。

　　5、根據(jù)三個測量點的偏差，用移液器專用的校正扳手（不同品牌的移液器的校正窗和扳手的形式是不同）通過移液器的校正窗進行調(diào)整。

　　6、重復3、4步，直至偏差在ISO8655的要求內(nèi)為止。

　　如果是電動移液器，那校正就簡單多了，一般測量完三個校正點的數(shù)據(jù)后，直接進入校正界面，將誤差數(shù)據(jù)輸入就可以自動校正了。

　　一般還是交給廠家或者代理商進行校正比較放心，一般地區(qū)總代都是購買了自動校正平臺的，將移液器放在上面，機器自動進行測量和校正工作的。

 

07

 

 

 

 

 

 

熒光生物顯微鏡

 

 

 

  

 

 

顯微鏡的操作方法及注意事項

1、使用分析測試中心顯微鏡，必須預約和登記。開機先開顯微鏡電源，需要用熒光時再開熒光；開機后，放上待觀察樣品，首先明場觀察(bright field)時，請選擇合適的物鏡，物鏡倍數(shù)從小到大觀察。將樣品置于載物臺上，調(diào)節(jié)高度和亮度。轉(zhuǎn)動載物臺時，請輕輕轉(zhuǎn)動。用完需將亮度調(diào)到最低再離開。

2、觀察熒光時，首先打開熒光光源，等待幾分鐘后再觀察。選擇合適的激發(fā)光，觀察完必須將熒光關(guān)閉再離開。

3、拍攝圖像時，在相連接的電腦上打開相應軟件，將顯微鏡的相應旋鈕打到view上，調(diào)節(jié)曝光時間等參數(shù)。用完需要將光源和照相機關(guān)閉。

4、用完后，請核對是否關(guān)閉熒光光源和顯微鏡電源，聚光鏡是否蓋上蓋子，載物臺是否放置低位，物鏡是否調(diào)至無物鏡對準載物臺，然后罩上目鏡，蓋上紅布袋防灰塵。

5、請在記錄本上如實登記。

6、儀器的光源是有壽命的，請本著節(jié)約原則，完成實驗時請及時關(guān)燈。若兩次使用間隔時間短可以不必關(guān)燈，若間隔時間長請及時關(guān)燈。因為經(jīng)常開關(guān)儀器也會影響光源壽命。

7、物鏡不可用手或者其他物體觸摸。所以觀察樣品盡量蓋蓋玻片，如果沒蓋蓋玻片的請務必注意樣品不得沾到并污染物鏡，若不小心污染了物鏡，請及時用擦鏡紙按“水→70%乙醇→100%乙醇”步驟從中心向外螺旋轉(zhuǎn)圈清理對應物鏡。

 

08

 

 

 

 

 

 

 

成像系統(tǒng)

 

 

 

 

  

 

 

凝膠成像分析系統(tǒng)可以應用在蛋白電泳凝膠，DNA凝膠，樣品進行圖像采集并進行定性和定量分析。

使用注意事項：

1、注意開機順序，先開凝膠成像系統(tǒng)，再打開電腦進入軟件。

2、紫外凝膠照相時要防止EB污染儀器，凝膠成像系統(tǒng)的門不能用污染的手套接觸，進行軟件操作時同樣不能被污染的手套接觸。

3、在使用紫外光源照相的過程中，不可以打開凝膠成像系統(tǒng)前面板。

4、照相后將廢膠取出，并用較軟的紙擦拭干凈。

5、調(diào)焦時要輕，動作不要劇烈。

6、保持觀測室內(nèi)環(huán)境干燥，及時將遺留在觀測板上的水或其他液體檫干。

7、使用儀器時，要將門及觀測臺關(guān)緊，否則將無法正常使用紫外燈。

8、盡可能不要將電腦連接到因特網(wǎng)或局域網(wǎng)上，同時在電腦上安裝殺毒軟件，做到專機專用。

9、較長時間不用儀器時，請將儀器用防塵罩蓋上。

10、為延長燈管的使用壽命，請觀測好凝膠后及時關(guān)閉光源。

 

09

 

 

 

 

 

 

 

 

pH計

 

 

 

 

 

  

 

 

pH計使用注意事項：

1、儀器標定校正的次數(shù)取決于試樣、電極性能及對測量的精確度要求，一般經(jīng)一次標定后可連續(xù)使用一周或更長時間，pH計校準時使用對應校準液，按照儀器說明書校準，在下列情況時，儀器必須重新標定：

（a）長期未用的電極和新?lián)Q的電極。

（b）測量濃酸（pH<2）以后，或測量濃堿（ph>12）以后。

（c）測量含有氟化物的溶液和較濃的有機溶液以后。

（d）被測溶液溫度與標定時的溫度相差過大時。

2、pH電極前端的保護瓶內(nèi)有適量電極浸泡溶液，電極頭浸泡其中，以保持玻璃球泡和液接界的活化。測量時旋松瓶蓋，拔出電極，用純水洗凈即可使用。使用后再將電極插進并旋緊瓶蓋，以防止溶液滲出，如發(fā)現(xiàn)保護瓶中的浸泡液有混濁，發(fā)霉現(xiàn)象，應及時洗凈，并調(diào)換新的浸泡液。

3、電極浸泡液的配制：電極浸泡液即為3MKCl。電極應避免長期浸泡在純水、蛋白質(zhì)溶液和酸性氟化物溶液中，并防止和有機硅油脂接觸。

4、經(jīng)常保持儀器的清潔和干燥，特別要注意保持電計、電極插口的高度清潔和干燥，否則將導致測量失準或失效，如有沾污可用醫(yī)用棉花和無水酒精揩凈并吹干。

5、復合電極前端的敏感玻璃球泡，不能與硬物接觸，任何破損和擦毛都會使電極失效。測量前和測量后都應用純水清洗電極，清洗后將電極甩干，不要用紙巾擦試球泡，這樣會使電極電位不穩(wěn)定，延長響應時間。在粘稠性試樣中測定后，電極需用純水反復沖洗多次，以除去粘在玻璃膜上的試樣，或先用適宜的溶劑清洗，再用純水洗去溶劑。

6、電極經(jīng)長期使用，或被測溶液中含有易污染敏感玻璃球泡或堵塞液接界的物質(zhì)，而使電極鈍化，其現(xiàn)象是敏感梯度降低，響應慢，讀數(shù)不準，可根據(jù)不同情況采取下列措施：

（a）玻璃球泡污染老化：將電極用0.1mol/L稀鹽酸浸泡24小時，用純水洗凈，然后再用電極浸泡液浸泡24小時，如果鈍化比較嚴重，也可將電極下端浸泡在4% HF（氫氟酸）中3~5秒種，用純水洗凈，然后在電極浸泡液中浸泡24小時，使之復新。

（b）玻璃球泡和液接界污染的清洗：（供參考）

污染物             清洗劑

無機金屬氧化物     低于1mol/L稀酸

有機油脂類物       稀洗滌劑（弱堿性）

樹脂高分子物質(zhì)     稀酒精、乙醚

蛋白質(zhì)血球沉淀物   酸性酶溶液（如食母生片）

顏料類物質(zhì)         稀漂白液、過氧化物

電極外殼的材料是聚碳酸酯，選用清洗劑時請注意，如四氯化碳、三氯乙稀、四氫呋喃等請慎用，因為這些試劑會溶解聚碳酸酯材料，從而使電極失效。

7、儀器一般配有三瓶pH校正溶液（pH4.00、pH6.86和pH9.18各一瓶），這三瓶不同顏色的校正緩沖溶液內(nèi)含防霉消毒劑，因此可以在環(huán)境溫度下長期存放而不變質(zhì)。

8、pH電極電極斜率低于85% 時（視測試精度和范圍而定，且校正緩沖溶液要準確），則應考慮對電極進行活化處理或更換電極。