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瓊脂糖凝膠電泳

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-04-26
 
  在凝膠電泳中,首先應(yīng)用的是瓊脂電泳,它具有下列優(yōu)點:(1)瓊脂含液體量 大,可達(dá)98-99%,近似自由電泳,但是樣品的擴散度比自由電泳小,對蛋白質(zhì)的吸附 極微。(2)瓊脂作為支持體有均勻,區(qū)帶整齊,分辨率高,重復(fù)性好等優(yōu)點。(3) 電泳速度快。(4)透明而不吸收紫外線,可以直接用紫外檢測儀作定量測定。(5) 區(qū)帶易染色,樣品易回收,有利于制止備。然而瓊脂中有較多硫酸根,電滲作用大。 瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,是由半乳糖和3.6-脫水-L- 半乳糖相互結(jié)合的鏈狀多 糖。含硫酸根比瓊脂少,因而分離效果明顯提高。   瓊脂(糖)電泳常用緩沖液的pH在6-9之間,離子強度為0.02-0.05。離子強度過 高時,會有大量電流通過凝膠,因而產(chǎn)生熱量,使凝膠的水份量蒸發(fā),析出鹽的結(jié) 晶,甚至可使凝膠斷裂,電流中斷。常用的緩沖液有硼酸鹽緩沖液與巴比妥緩沖液。 為了防止電泳時兩極緩沖液槽內(nèi)pH和離子強度的改變,可在每次電泳后合并兩極槽內(nèi) 的緩沖液,混勻后再用。
 
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