一、測定溶液中物質的含量
可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質的含量。測定標準溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度,進行比較,由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測出不同濃度的標準液的吸光度,繪制標準曲線,在選定的濃度范圍內(nèi)標準曲線應該是一條直線,然后測定出未知液的吸光度,即可從標準曲線上查到其相對應的濃度。
含量測定時所用波長通常要選擇被測物質的最大吸收波長,這樣做有兩個好處:⑴靈敏度大,物質在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異;⑵可以避免其它物質的干擾。
二、用紫外光譜鑒定化合物
使用分光光度計可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度的溶液,測定此溶液對每一種單色光的吸光度,然后以波長為橫座標,以吸光度為縱座標繪制吸光度──波長曲線,此曲線即吸收光譜曲線。各種物質有它自己一定的吸收光譜曲線,因此用吸收光譜曲線圖可以進行物質種類的鑒定。當一種未知物質的吸收光譜曲線和某一已知物質的吸收光譜曲線開關一樣時,則很可能它們是同一物質。一定物質在不同濃度時,其吸收光譜曲線中,峰值的大小不同,但形狀相似,即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結構造成的,含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單,同一種物質的紫外吸收光譜應完全一致,但具有相同吸收光譜的化合物其結構不一定相同。除了特殊情況外,單獨依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結構,必須與其它方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質的定量分析和純度分析。