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親參的采卵方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2008-01-23
核心提示:刺參人工繁殖的第一個步驟,便是取得大量優(yōu)質(zhì)、成熟的配子(精、卵),這是人工育苗成敗的關(guān)鍵。親參采卵的途徑有以下方法: 一、自然產(chǎn)卵親參采捕的時間適宜,性腺發(fā)育充分成熟,可以采用自然產(chǎn)卵法。 這種方法的優(yōu)點是簡單易行,基本上可以滿足育苗的需要。刺參往往

  刺參人工繁殖的第一個步驟,便是取得大量優(yōu)質(zhì)、成熟的配子(精、卵),這是人工育苗成敗的關(guān)鍵。親參采卵的途徑有以下方法:

  一、自然產(chǎn)卵親參采捕的時間適宜,性腺發(fā)育充分成熟,可以采用自然產(chǎn)卵法。

  這種方法的優(yōu)點是簡單易行,基本上可以滿足育苗的需要。刺參往往在傍晚或夜間產(chǎn)卵、排精,不能人為控制產(chǎn)卵時間和產(chǎn)卵量,有時還會發(fā)生產(chǎn)卵量過大、精液過多造成水質(zhì)敗壞而導(dǎo)致受精卵大量解體的現(xiàn)象。因此,應(yīng)安排夜間值班人員,隨時觀察,及時收集,或達(dá)到采卵量后將親參取出放到其他池中,或?qū)⑦^多的雄性排精刺參移出排卵池。

  二、人工刺激產(chǎn)卵誘導(dǎo)刺參排精產(chǎn)卵的常用方法有溫差法、紫外線海水浸泡法、陰干流水刺激法。

  1.溫差法

  操作溫差在蓄養(yǎng)海參的培育海水溫度下,向上或向下增減5℃~8℃為宜。誘導(dǎo)時,可將親參直接置入高溫水中(直接升溫);或?qū)⒂H參先以低水溫處理后,再以高水溫處理(先降溫后升溫);或是將親參以高低水溫反復(fù)處理(高低溫交互操作)。通常一次升(降)水溫的處理時間為1小時到隔夜不等,需視親參狀況而定。若發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)卵跡象,應(yīng)移出個體放到正常水溫環(huán)境中。

  2.紫外線海水浸泡法

  此方法是用經(jīng)紫外線燈管照射過的海水,誘導(dǎo)親參生殖(其機(jī)制尚不明了)。通常10升海水,以8瓦特功率紫外線燈管照射,在水流速率10升/分鐘狀況下,需循環(huán)1小時后方視為其已達(dá)飽和。循環(huán)過程中充分曝氣,使水體中溶解氧充足。“紫外線海水”制備完成后,將親參置入其中,最高以每升紫外線海水中放一頭為限。通常雄性個體在誘導(dǎo)后0.5小時即排精,雌性個體則需較長時間(45分鐘到數(shù)小時不等)。在誘導(dǎo)過程中需仔細(xì)觀察親參狀況,遇有自割或吸水膨大的個體,需將其立即移出至正常海水環(huán)境中。

  3.陰干流水刺激法

  一般是在傍晚以后進(jìn)行。先將蓄養(yǎng)池內(nèi)的海水放干,讓親參陰干45分鐘到1小時,再用水沖擊10分鐘~15分鐘,或流水40分鐘~50分鐘,然后將親參放入加有新鮮過濾海水的池中。一般情況下2小時左右,親參開始向表層池壁爬行,移動頻繁,經(jīng)常將頭部抬起在海水表層左右擺動,雄性開始排精,0.5小時后雌參開始產(chǎn)卵。在實際生產(chǎn)中陰干、流水和升降溫的方法常被結(jié)合使用。

  4.氯化鉀注射法

  本方法適用于體型小且成熟度高的個體。其作用機(jī)制為通過提高親參體腔體液中的鉀離子濃度,使體壁肌收縮,擠壓生殖巢而將配子排出。氯化鉀的注射濃度為0.5摩爾/升~1摩爾/升,親參濕重為0.5公斤時總注射量為5毫升,且應(yīng)以1毫升~2毫升劑量每隔10分鐘注射1次,以避免刺激過度。為了盡可能不使親參自肛門排出內(nèi)臟,宜以針柄將其肛門固定于水面之上。若其生殖腺成熟度高,可在短時間內(nèi)排出配子。反之,若親參成熟不好則會引起自割。

  5.解剖法本方法

  適用于個體大且誘導(dǎo)生殖困難的個體(通常為雌性,卵子未達(dá)到最后成熟階段)。使用刀片自親參觸手部后方1/4體長背側(cè)處,切出約3厘米長的開口,雙手輕輕推擠親參體中段部位使其生殖巢流出。

  采得的生殖腺立即以干凈海水清洗數(shù)次,防止親參的體液影響生殖腺的品質(zhì)。此時所獲得的卵子通常沒有受精能力(未達(dá)到最后成熟),需加以催熟后才能進(jìn)行受精。催熟的方法有藥物浸泡法及卵巢切碎法,分別敘述如下:

 。1)藥物浸泡將卵巢用探針挑破,釋放出的卵子以DTT、BAL或L-Cysteine等藥品,配制成濃度為0.1摩爾/升的海水溶液,浸泡15分鐘后,以干凈海水重復(fù)清洗1小時,再進(jìn)行授精。采用藥物浸泡法時,需嚴(yán)格遵守劑量及浸泡時間以免藥品對卵子造成毒害。將所采得卵子放到容器中,加入微量(約和卵量同體積)的干凈海水,隨即加入精子(一頭雌體的卵量,加入未稀釋精液1滴或已稀釋精液數(shù)滴)并且輕輕攪拌(搖晃),而后每隔5分鐘以等比例增加的量加入干凈海水稀釋。

  (2)沉淀洗卵法將所采得的卵子浸泡于干凈的海水中備用,另將干凈的精液加入10倍體積海水中稀釋并使之活化。在卵液中加入精子稀釋液(一頭雌體的卵量,加入數(shù)滴精子稀釋液)并且輕輕攪拌使之充分受精。而后將精卵混合液靜置,待受精卵沉淀,吸出上層含精子海水,加入干凈海水清洗受精卵

 

 

 
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