AMAMFSAc05030 巧克力制品 藻酸鹽 溶解法
AM-AM-FS-Ac-05030
巧克力制品中的藻酸鹽
1.試劑
氫氧化鐵-硫酸試劑——在兩個離心瓶中各將10g FeCl3·6H2O溶于約100ml水中，用過量的NH4OH沉淀Fe(OH)3(通過氣味來鑒別)。用水洗滌沉淀約5次，離心，傾潷上層清液直至殘留的NH3氣味很小為止。每次洗之前都搗碎離心過的沉淀。將沉淀在蒸汽浴上干燥或在烘箱中過夜。搗碎，再干燥，用刮勺或研缽研磨成適當的細粉末。在密封容器中存放。
氫氧化鐵(潮濕的)可以代替上述沉淀的Fe(OH)3，將這一產物轉移到離心瓶中，振蕩，離心，傾潷上層清液，洗滌，按上面的方法干燥。在50ml具玻璃塞量杯中加入0.5g干燥粉末，加50ml H2SO4充分振蕩，讓其沉降至清晰(通常要4—7d)。一些硫酸鐵鹽明顯地粘附于壁上，但7d之后，試劑即可使用。三周之后制備新鮮的。用前按下面的方法檢驗:
在含有5滴0.1M NaOH的水中，溶解少量的(1-5mg)市售藻酸鹽，加4體積乙醇沉淀藻酸鹽。離心，傾潷，在蒸汽浴上干燥至無乙醇氣味存在。采用空氣對流法除去最后的痕量乙醇。加3滴0.1M NaOH，用玻璃棒攪拌使之溶解，加入2ml Fe-H2S04試劑。溶液逐漸轉變?yōu)榧t紫色，這通常需要1h，或許時間更長些，主要看存在的藻酸鹽量。如果溶液變成棕色，再加2ml試劑，用玻璃棒使之混合，靜置。
2.試驗過程
稱量含10-20mg藻酸鹽樣品放入250ml離心瓶，加水使體積至40-50ml，來回振蕩使之溶解。用飽和Na3PO4溶液調節(jié)pH值至8-9，通常用5滴就足夠了。加約0.5g胰酶和3滴HCHO，充分振蕩1min，靜置2-16h。
以1200r/min離心2-3min，傾潷清液到250ml離心瓶中，棄去殘留物。加3-4體積乙醇，振蕩，靜置1h以上，其間振蕩數次。如同前法離心并棄去液體。在殘留物中加50ml水和1滴10% NaOH，并充分振蕩使殘留物完全溶解。加3g脫色炭 (NuChar炭)，充分振蕩1h，在振蕩器上更好。不要離心，直接傾入折疊濾紙，在250ml離心瓶中收集濾液。如果濾液不清，再倒回濾紙上過濾幾次。如果過濾較慢，讓過濾過夜。由于碳吸附了一些藻酸鹽，為了回收它們(約1mg)，用另外50ml水和5滴0.1M NaOH共振蕩再提取碳，將這一濾液加入到第一次提取液中。
向濾液中加入4體積的乙醇，振蕩，靜置1h以上，最好是放置過夜。離心，傾潷，保留殘留物。殘留物中含有藻酸鹽，樹膠和明膠。在蒸汽浴上干燥殘留物，也可以用空氣環(huán)流法，直至不再嗅到乙醇氣味。冷卻，加3滴0.1M NaOH溶解殘留物，使用玻璃棒盡可能地使其完全溶解。加2ml Fe-H2SO4試劑，用玻棒混合，如果溶液很快變成紅紫色，所加試劑已足夠。如出現棕色，則另加2ml試劑。因顏色顯示較慢，可讓其靜置過夜。對于藻酸鹽，深紫色是陽性試驗。如果試驗是陰性。重新測定，使用兩倍的樣品，增加活性炭至4g，振蕩1.5h，以進一步確認。
3.來源
AOAC 官方方法959.06第17版