一、生物學(xué)性狀
。ㄒ唬┬螒B(tài)與結(jié)構(gòu)
病毒呈球形,直徑約為27nm。無(wú)囊膜。衣殼由60個(gè)殼微粒組成,呈20面體立體對(duì)稱(chēng),有HAV的特異性抗原(HAVAg),每一殼微粒由4種不同的多肽即VP1、VP2、VP3和VP4所組成。
在病毒的核心部位,為單股正鏈RNA。除決定病毒的遺傳特性外,兼具信使RNA的功能,并有傳染性。
HAV的單股RNA,其長(zhǎng)度相當(dāng)于7400個(gè)核苷酸。在RNA的3′末端有多聚的腺苷序列,在5′末端以共價(jià)形式連接一由病毒基因編碼的細(xì)小蛋白質(zhì),稱(chēng)病毒基因組蛋白(Viral protein ,genomic,VPG)。
它在病毒復(fù)制過(guò)程中,能使病毒核酸附著于宿主細(xì)胞的核蛋白體上進(jìn)行病毒蛋白質(zhì)的生物合成。
。ǘ┎《靖腥灸P团c培養(yǎng)
黑猩猩和狨猴對(duì)HAV易感,且能傳代,經(jīng)口或靜脈注射可使動(dòng)物發(fā)生肝炎,并能在肝細(xì)胞凍中檢出HAV。在潛伏期和急性期的早期,HAV可隨糞便排出;謴(fù)期血清中能檢出HAV的相應(yīng)抗體。
1979年P(guān)rovost 等首次成功地將已適應(yīng)在狨猴傳代的毒株培養(yǎng)于原狨猴肝細(xì)胞或恒河猴胚腎細(xì)胞FPhK6株中。我國(guó)學(xué)者也先后成功地使HAV在肝癌細(xì)胞株中增殖。病毒在組織培養(yǎng)細(xì)胞中雖可增殖。但不引起細(xì)胞病變,且增殖與細(xì)胞釋放均甚緩慢。應(yīng)用免疫熒光試驗(yàn),可檢出組織細(xì)胞中的HAV,亦可用放射免疫方法,自細(xì)胞溶解物中檢出HAV。
(三)抵抗力
初步實(shí)驗(yàn)證明,HAV對(duì)乙醚、60℃加熱1小時(shí)及pH3的作用均有相對(duì)的抵抗力(在4℃可存活數(shù)月)。但加熱100℃5分鐘呈用甲醛溶液、氯等處理,可使之滅活。非離子型去垢劑不破壞病毒的傳染性。
二、致病性與免疫性
。ㄒ唬﹤魅驹磁c傳播途徑
甲型肺炎病毒主要通過(guò)糞-口途徑傳播,傳染源多為病人。甲型肝炎的潛伏期為15~45天,病毒常在患者轉(zhuǎn)氨酸升高前的5~6天就存在于患者的血液和糞便中。發(fā)病2~3周后,隨著血清中特異性抗體的產(chǎn)生,血液和糞便的傳染性也逐漸消失。長(zhǎng)期攜帶病毒者極罕見(jiàn)。
HAV隨患者糞便排出體外,通過(guò)污染水源、食物、海產(chǎn)品(如毛蚶等)、食具等的傳播可造成散發(fā)性流行或大流行。也可通過(guò)輸血或注射方式傳播,但由于HAV在患者血液中持續(xù)時(shí)間遠(yuǎn)較乙型肺炎病毒為短,故此種傳播方式較為少見(jiàn)。
。ǘ┲虏C(jī)理與免疫
根據(jù)臨床和流行病學(xué)觀(guān)察,甲型肝炎病毒多侵犯兒童及青年,發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)而遞減。臨床表現(xiàn)多從發(fā)熱、疲乏和食欲不震開(kāi)始,繼而出現(xiàn)肝腫大、壓痛、肝功能損害,部份患者可出現(xiàn)黃疸。多數(shù)情況下,無(wú)黃疸病例發(fā)生率要比黃疸型高許多倍,但大流行時(shí)黃疸型比例增高。40歲上成人中,80%左右均有抗HAV抗體。HAV經(jīng)糞一口途徑侵入人體后,先在腸粘膜和局部淋巴結(jié)增殖,繼而進(jìn)入血流,形成病毒血癥,最終侵入靶器官肝臟,在肝細(xì)胞內(nèi)增殖。由于在組織培養(yǎng)細(xì)胞中增殖緩慢并不直接引起細(xì)胞損害,故推測(cè)其致病機(jī)理,除病毒的直接作用外,機(jī)體的免疫應(yīng)答可能在引起肝組織損害上起一定的作用,F(xiàn)可應(yīng)用狨猴作為實(shí)驗(yàn)感染模型以研究HAV的致病機(jī)理。動(dòng)物經(jīng)大劑型病毒感染后1周,肝組織呈輕度炎癥反應(yīng)和有小量的局灶性壞死現(xiàn)象。此時(shí)感染動(dòng)物雖然肝功能異常,但病情穩(wěn)定?墒窃趧(dòng)物血清中出現(xiàn)特異性抗體的同時(shí),動(dòng)物病情反而轉(zhuǎn)劇,肝組織出現(xiàn)明顯的炎癥和門(mén)脈周?chē)?xì)胞壞死。由此推論早期的臨床表現(xiàn)是HAV本身的致病作用,而隨后發(fā)生的病理改變是一種免疫病理?yè)p害。
在甲型肝炎的顯性感染或隱性感染過(guò)程中,機(jī)體都可產(chǎn)生抗HAV的lgm 和lgG抗體。前者在急性期和恢復(fù)期出現(xiàn),后者在恢復(fù)后期出現(xiàn),并可維持多年,對(duì)同型病毒的再感染有免疫力。另外有活力的NK細(xì)胞,特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞(CD8 )在消滅病毒、控制HAV感染中亦很重要。
三、微生物學(xué)診斷
目前對(duì)甲型肝炎的微生物學(xué)檢查,以HAV的抗原和抗體為主。應(yīng)用的方法包括免疫電鏡、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、免疫粘附血凝試驗(yàn)、固相放射免疫和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、多聚酶鏈反應(yīng)、cDNA-RNA分子雜交技術(shù)等?笻AVLgm 具有出現(xiàn)早、短期達(dá)高峰與消失快的特點(diǎn),故它測(cè)得是甲型肝炎新近感染的標(biāo)志?笻AVLgG 的檢測(cè)有助于流行病學(xué)檢查。