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蛋白質(zhì)濃縮方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28

蛋白濃縮方法基本有:
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機(jī)溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……

1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗(yàn)要求的儀器簡(jiǎn)單,但是常常導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。

2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!

3,硫酸銨沉淀法:利用高濃度鹽將蛋白質(zhì)析出(鹽析)
選擇硫酸按是因?yàn)椋蝴}析有效性,pH范圍廣,溶解度高,溶液散熱少,經(jīng)濟(jì)!

4,(低溫)有機(jī)溶劑沉淀法:強(qiáng)調(diào)低溫(0-4度以下)是因?yàn)?0度時(shí)蛋白會(huì)在有機(jī)溶劑中變性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2 離子,pH值

5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG時(shí)旨在個(gè)別情況下才會(huì)是蛋白質(zhì)稍有變性!他溶解是散熱低,形成沉淀的平衡時(shí)間短,通常達(dá)到30%時(shí)蛋白質(zhì)就會(huì)達(dá)到最大量的沉淀!

6,超濾法:主要針對(duì)小體積蛋白質(zhì)溶液(幾ml)此法更不易引起變性!不過得有濃縮器,不是哪個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有的!

7,透析法:主要用于更換蛋白質(zhì)的緩沖液!的有透析袋!不需要特殊的儀器!

8,離子交換層析:可用陰離子交換樹脂進(jìn)行濃縮!

9,冷凍干燥法:在冷凍狀態(tài)下讓揚(yáng)品種的液體升華


具體你的實(shí)驗(yàn)應(yīng)該是做一種分泌蛋白吧?
濃縮后要干什么,需要活性蛋白么?
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備如何,導(dǎo)師經(jīng)費(fèi)如何?
這些都要考慮!!

 

 

 
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