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秋海棠組培快繁

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

一、植物

竹節(jié)秋海棠(B.President-carnot)

二、材料類別

葉片、葉柄、莖段

三、培養(yǎng)條件

以MS為基本培養(yǎng)基。誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)基:(1)MS+BA3——5mg/L(單位下同)+NAA0.1——0.5。叢生芽增殖培養(yǎng)基。(2)MS+BA1.0+NAA0.1。(3)MS十BA0.5十NAA0.1。(4)壯苗培養(yǎng)基:1/2MS(液體)。(5)誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基:1/2MS +NAA0.2。上述培養(yǎng)基均加3.0%蔗糖、0.8%瓊脂,pH值5.8。培養(yǎng)溫度(24±2)℃,光照不宜過強(qiáng),有80Olx左右即可,光照10h/d。

四、生長與分化情況

(一)無菌材料獲得 將竹節(jié)秋海棠已平展之幼嫩葉片、葉柄、莖段先用適量洗衣粉對水洗滌,然后用自來水反復(fù)沖洗,于無菌條件下用75%酒精藥棉擦拭干凈,放于飽和漂白粉溶液10分鐘,后置于0.1%升汞溶液中消毒2分鐘,用無菌水沖洗5——6次,消毒濾紙吸收干表面水分,葉片切成0.5cm見方小塊,葉柄、莖段則切成約長1cm左右長條,均接種于培養(yǎng)基(1)上。

(二)叢芽的誘導(dǎo)與增殖 接種、培養(yǎng)1周后,葉、葉柄、莖段周圍開始膨大、增厚,質(zhì)地變硬,逐漸形式黃綠色愈傷組織,3周后漸漸分化出小芽點(diǎn),芽點(diǎn)繼續(xù)生長,約5周左右形成明顯的叢生芽。將叢生芽切成小塊,接種于(2)和(3)培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖,小芽叢上不斷分化出很多幼芽。葉、葉柄、莖段在兩個(gè)培養(yǎng)基上增殖速率基本相同,約4周左右繼代1次,增殖系數(shù)可達(dá)6——9。

(三)壯苗 在進(jìn)行大量增殖階段后,我們停止固體培養(yǎng)而改為液培,將分化芽轉(zhuǎn)接到1/2MS,3周后,可發(fā)現(xiàn)生長健壯、個(gè)體粗壯的無根苗。這為以后生根、移苗出瓶,提高適應(yīng)外界環(huán)境,增強(qiáng)抗病能力,提供了良好條件,移栽更易成活。

(四)根的誘導(dǎo) 將高約3cm、生長健碩的無根壯苗,接種到培養(yǎng)基(5)上。2周后,苗基部長出輻射狀白色小根,每株生根5——7條,3周后,根伸長至1.0——1.5cm,生根率達(dá)100%。

(五)試管苗的移栽 將培養(yǎng)有試管苗的三角瓶蓋打開,在實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)處煉苗3d,取出小苗,洗去根部殘留培養(yǎng)基,種植前根部在0.2%Na2SO4溶液中滯留片刻。移栽到用高壓滅菌消毒過的蛭石+細(xì)沙+園土(1:1:1)的混合基質(zhì)中,地上部噴施0.1%多菌靈溶液,用薄膜覆蓋,每天噴水2次,1周后揭膜,成活率在95%以上。

 

 

 
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