組織的非特異性染色的機(jī)理很復(fù)雜,其產(chǎn)生的原因主要可分為以下幾點(diǎn):
(1)一部分熒光素未與蛋白質(zhì)結(jié)合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。
。2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結(jié)合。
。3)除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類屬抗原(如Forssman氏抗原),可與組織中特異性抗原以外之之相應(yīng)抗體結(jié)合。
。4)從組織中難于提純抗原性物質(zhì),所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體,以致容易混淆。
(5)抗體分子上標(biāo)記的熒光素分子太多,這種過量標(biāo)記的抗體分子帶過多的陰離子,可吸附于正常組織上而呈現(xiàn)非特異性染色。
。6)熒光素不純,標(biāo)本固定不當(dāng)?shù)取?/div>
(1)一部分熒光素未與蛋白質(zhì)結(jié)合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。
。2)抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白,可與組織成分結(jié)合。
。3)除去檢查的抗原以外,組織中還可能存在類屬抗原(如Forssman氏抗原),可與組織中特異性抗原以外之之相應(yīng)抗體結(jié)合。
。4)從組織中難于提純抗原性物質(zhì),所以制備的免疫血清中往往混雜一些抗其他組織成分的抗體,以致容易混淆。
(5)抗體分子上標(biāo)記的熒光素分子太多,這種過量標(biāo)記的抗體分子帶過多的陰離子,可吸附于正常組織上而呈現(xiàn)非特異性染色。
。6)熒光素不純,標(biāo)本固定不當(dāng)?shù)取?/div>