世界衛(wèi)生組織2003年第二版《實驗室生物安全手冊》和衛(wèi)生部2002年發(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS233-2002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》對于臨床實驗室生物安全防護工作的開展有積極的借鑒作用.在學(xué)習(xí)有關(guān)文件和標(biāo)準(zhǔn)、建立臨床實驗室生物安全防護體系之前,我們首先應(yīng)該清醒地認(rèn)識到醫(yī)院內(nèi)的臨床實驗室與疾病預(yù)防控制機構(gòu)、科研機構(gòu)的實驗室有所不同,因為臨床實驗室或檢驗科面對的是就診者未知疾病的標(biāo)本,無法判斷標(biāo)本中所帶的致病微生物.根據(jù)世界衛(wèi)生組織《實驗室生物安全手冊》和衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》,依據(jù)病原微生物的傳染性,實驗室感染的機會,感染后對人或動物的危害程度,以及是否有有效的預(yù)防和治療措施等因素,病原微生物被分為四類,第一類病原微生物是指在通常情況下不可能引起人或動物疾病的微生物;第二類病原微生物是指能夠引起人或動物疾病,在正常情況下對實驗室工作人員、社區(qū)、動物或者環(huán)境不會引起嚴(yán)重危害,發(fā)生實驗室暴露可能引起嚴(yán)重感染,但有有效的預(yù)防和治療措施的微生物;第三類病原微生物是指能夠引起嚴(yán)重的人或動物疾病,在個體之間的偶然接觸不會造成病原傳播,但有有效的預(yù)防和治療措施的微生物;第四類病原微生物是指能夠引起嚴(yán)重的人或動物疾病,而且容易在個體間發(fā)生直接或者間接傳播,通常沒有有效的預(yù)防和治療措施的微生物.從生物安全防護的角度實驗室共分為四級.一級實驗室為實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實驗室等.二級生物安全防護實驗室為實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物.三級實驗室為實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預(yù)防傳染的疫苗.四級實驗室為實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人體具有高度的危險性,通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素.與上述情況類似的不明微生物,也必須在四級生物安全防護實驗室中進行.待有充分?jǐn)?shù)據(jù)后再決定此種微生物或毒素應(yīng)在四級還是較低級別的實驗室中處理.

    據(jù)以上定義,醫(yī)院內(nèi)的臨床實驗室或檢驗科因接觸可能含有致病微生物的標(biāo)本,應(yīng)達到二級生物安全防護實驗室要求,二級生物安全防護實驗室適合于對人和環(huán)境有中度潛在危險的病源,它與一級生物安全防護實驗室的區(qū)別在于:1、實驗人員是否接受過生物安全防護的培訓(xùn);2、是否有進入實驗室的限制措施;3、對已受到或可能受到污染銳器的使用是否足夠重視;4、某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的實驗過程,是否在生物安全柜中或其它物理抑制設(shè)備中進行.

    二級生物安全防護實驗室應(yīng)注意實驗室設(shè)計與建造、實驗室安全設(shè)備與個體防護、實驗室制度建設(shè)和操作要點三方面的內(nèi)容:

 

一、實驗室的設(shè)計與建造

    根據(jù)WHO和我國衛(wèi)生部已發(fā)布實施的《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》,實驗室的設(shè)計與建造時應(yīng)注意以下內(nèi)容:

1. 實驗室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉;

2. 每個實驗室均應(yīng)設(shè)置洗手池,宜設(shè)置在靠近出口處;

3. 實驗室圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔,不適宜用地毯.地面應(yīng)防滑、無縫隙;

4. 實驗臺表面應(yīng)能防水,耐酸堿、耐有機溶劑、耐熱,耐用于消毒的相關(guān)化學(xué)物質(zhì);

5. 實驗室中的家具應(yīng)牢固.各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙,以易于清潔.實驗室使用的椅子及其它器具,應(yīng)覆蓋易于清洗的非織物;

6. 應(yīng)設(shè)置實施各種消毒方法的設(shè)施,如高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等對廢棄物進行處理;

7. 應(yīng)有專門放置生物廢棄物的容器.

8. 應(yīng)設(shè)置洗眼裝置.

9. 實驗室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志.

10. 實驗室應(yīng)有可開啟的窗戶,應(yīng)設(shè)置紗窗.

11. 實驗室宜有不少于每小時3～4次的通風(fēng)換氣次數(shù).

12. 安裝生物安全柜時,要考慮到房間的通風(fēng)和排風(fēng),不會導(dǎo)致生物安全柜超出正常參數(shù)運行.生物安全柜應(yīng)遠離門、遠離能打開的窗,遠離行走區(qū),遠離其他可能引起風(fēng)壓混亂的設(shè)備,保證生物安全柜氣流參數(shù)在有效范圍內(nèi). 

 

二、實驗室安全設(shè)備及個體防護

1、實驗室應(yīng)配備必要的生物安全柜或其它物理遏制裝置并正確使用,以二級以上(含二級)生物安全柜為宜.

2、當(dāng)必須在生物安全柜外處理微生物時,需采取面部保護措施如眼鏡、口罩、面罩或其它防濺裝置.

3、在實驗室內(nèi)工作必須使用專用的防護性外衣或制服.人員到非實驗室區(qū)域如咖啡屋、圖書館、門房時,防護服必須留在實驗室.防護服可以在實驗室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中.

4、可能接觸潛在傳染源、被污染的實驗臺表面或設(shè)備時,需戴手套.當(dāng)檢測工作結(jié)束時或手套破損時,應(yīng)摘除手套.一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用.戴手套不能接觸"潔凈"設(shè)施表面如鍵盤、電話等,也不宜到實驗室外.脫掉手套后,要洗手.

5、可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作包括離心、劇烈震蕩或混勻、開啟裝有傳染源的容器容器內(nèi)部的壓力可能與大氣壓不一致均應(yīng)在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進行,并使用個體防護設(shè)備.若選用真空采血管或帶安全罩的離心杯,則離心可在開放實驗室內(nèi)進行,而采血管或離心杯須在生物安全柜中打開或在離心機中靜置30分鐘后打開.

 

三、實驗室安全制度建設(shè)和操作要點

    安全制度的建設(shè)對于臨床實驗室而言是生物安全防護的核心,因為多數(shù)實驗室的建筑格局已經(jīng)形成,實驗室很難改變,實驗室安全設(shè)備如生物安全柜和工作人員的防護用具只要有足夠的經(jīng)費支持也比較容易獲得,目前最大的問題是實驗人員的安全觀念及軟件建設(shè).二級實驗室的操作要點如下:

1.實驗室人口須貼上生物危險標(biāo)志,注明危險因子、生物安全級別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序.

2.禁止非工作人員進人實驗室.參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進入.

3.禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物.

4.接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開實驗室前要洗手.

5.以移液器吸取液體,禁止口吸.

6.制定尖銳器具的安全操作規(guī)程.

7.按照實驗室安全規(guī)程操作,降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生.

8.每天至少消毒一次工作臺面,活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒.

9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活,如高壓滅活.需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運輸及消毒滅菌.

10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種 如卡介苗等;

11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底,并根據(jù)需要定期收集血清樣本,應(yīng)有檢測報告,如有問題及時處理;

12.將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊,由實驗室負(fù)責(zé)人專門保管,工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作.

13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓(xùn),掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序.

14.實驗設(shè)備在運出修理或維護前必須進行消毒.

15.人員暴露于病毒時,及時向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人匯報并記錄. 

制定生物安全手冊,將以上要點歸納至實驗室內(nèi)務(wù)管理、尖銳器具安全使用、實驗室消毒防護、標(biāo)本采集運輸、廢棄物處理、工作人員防護、差錯事故處理等規(guī)章制度中.

    需要重申的是對于目前幾乎沒有任何防護措施的醫(yī)院檢驗科,認(rèn)真學(xué)習(xí)國務(wù)院即將頒布的《致病微生物實驗室安全管理條例》、世界衛(wèi)生組織《實驗室生物安全手冊》和衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》,制定切實符合醫(yī)院臨床實驗室或檢驗科實際情況的安全防護措施是非常必要的.我們應(yīng)以科學(xué)的態(tài)度對待實驗室的生物安全問題.首先實驗室應(yīng)對實驗室的風(fēng)險級別進行評估,保證提供必要的生物安全防護措施,尤其對檢驗科內(nèi)風(fēng)險級別較高的、接觸高危標(biāo)本幾率較大的區(qū)域如微生物和分子生物學(xué)室予以高度重視,切實保護好實驗室工作人員和環(huán)境的安全,盡最大努力減少實驗人員和環(huán)境被感染的可能.