蔓荊子為常用中藥材，中國(guó)藥典收載蔓荊子商品為馬鞭草科植物單葉蔓荊Vitex trifolia L.var.simplicifolia Cham.或三葉蔓荊V.trifolia L.的干燥成熟果實(shí)。單葉蔓荊分布廣，產(chǎn)量大，在我國(guó)主要分布在山東、江西一帶。蔓荊子作為中藥，具有疏散風(fēng)熱、清利頭目的功效[1]。目前，許多植物提取廠家都在生產(chǎn)蔓荊子提取物，但他們都是以牡荊素(Vitexin)為有效成分指標(biāo)在生產(chǎn)，產(chǎn)品也是以牡荊素為指標(biāo)在向客戶銷售，我們經(jīng)過(guò)對(duì)蔓荊子提取物的研究發(fā)現(xiàn)，真正起主要作用的是蔓荊子黃素，根本就沒(méi)有牡荊素的成分。我們對(duì)蔓荊子提取物進(jìn)行了分離和測(cè)定，并從中分離出來(lái)了蔓荊子黃素，并對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果很好，對(duì)蔓荊子提取物的生產(chǎn)控制有可靠依據(jù)。

一、蔓荊子黃素的分離

1、儀器、試劑與提取物

1、1 儀器  X4型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀，溫度計(jì)未校正。HITACHI-200型紫外光譜儀。Shimadzu-400型紅外光譜儀。FX-90Q AM-300核磁共振儀，HP       5989A色-質(zhì)聯(lián)用儀。

1、2  試劑  層析用硅膠為青島海洋化工產(chǎn)品，Sephodex LH-20凝膠樹脂，石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇均為分析純

1、3  提取物  蔓荊子提取物為自己生產(chǎn)產(chǎn)品

2、蔓荊子提取物的分離鑒定

Me OH

max
 
取蔓荊子提取物1kg，用95%乙醇溶解，濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮成稠膏，拌入硅膠，干燥后上硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，分別收集，根據(jù)薄層點(diǎn)板定性檢查，取蔓荊子黃素部分，再上凝膠樹脂，用氯仿-甲醇（1：1）洗脫，結(jié)晶分離，得兩個(gè)化合物，一個(gè)為黃色細(xì)針狀結(jié)晶，一個(gè)為黃色結(jié)晶。

 黃色結(jié)晶，mp189~190℃，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，UVλ    mn；256，273（sh），372；加三氯化鋁-鹽酸263，280（sh），371；加醋酸鈉257，275，350（10min后不減弱）；加醋酸鈉-硼酸255，270，352。MSm/z；374（M+，100），359，355，331，316，301，285，273，257，245，217，187，173，164，151，135，135，121，93，69，53，43。1HNMRδppm：

3.73，3.80，3.87，3.92（s，OCH3×4），6.87（1H，s，8-H），7.1（1H，d，J=9.2H z，5’-H），7.5（1H，dd，J=9.2，3.0Hz，6’-H），7.6（1H，d，J=3.0Hz，2’-H），根據(jù)以上化學(xué)性質(zhì)及光譜數(shù)據(jù)，鑒定為蔓荊子黃素。

黃色細(xì)針狀結(jié)晶，mp242~243℃（含水甲醇重結(jié)晶，文獻(xiàn)值236~238℃），鹽酸-

MeOH

max
 
鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，UVλ    nm；260，273（sh），351；加甲醇鈉270，404；加三氯化鋁276，295（sh）,405；加三氯化鋁-鹽酸268，280（sh），296（sh），372，400（sh）；加醋酸鈉265，402（10min后不減弱），加醋酸鈉-硼酸264，376。MS m/z；360（M+，100），345，341，319，302，299，274，259，245，231，217，203，181，166，153，137，121，109，97，81，69，55，43。1HNMRδppm：3.37，3.80，3.92（s，OCH3×3），6.68（1H，s，8-H），6.92（1H，d，J=8.5H z，5’-H），7.49(1H，dd，J=8.5，2.0Hz，6’-H)，7.6（1H，d，J=2.0Hz，2’-H），9.36，9.79，12.64（s）各一羥基上活潑氫，重水交換后消失。根據(jù)以上化學(xué)性質(zhì)及光譜數(shù)據(jù)，鑒定為3，6，7-三甲基槲皮萬(wàn)壽菊素[2] 。 

二、蔓荊子黃素的含量測(cè)定

2、儀器與試劑

2、1儀器 美國(guó)熱電TSP高效液相色譜儀，7725i自動(dòng)進(jìn)樣器，AG135十萬(wàn)分子一電子天平

2、2 試劑 甲醇、磷酸均為分析純，水為雙重蒸餾水，對(duì)照品蔓荊子黃素自制，經(jīng)HPLC分析，純度為99.58%，蔓荊子提取物自己生產(chǎn)。

3、含量測(cè)定

3、1 色譜條件：色譜柱C18柱，流動(dòng)相：甲醇-0.4%磷酸溶液（60：40），檢測(cè)波長(zhǎng)258NM，流速1.0ml/min，柱溫：30℃

3、2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密稱取干燥至恒重的蔓荊子黃素對(duì)照品1.5mg，置于10ml容量瓶中，甲醇溶解定容，作為對(duì)照品溶液。精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置10ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，照上述條件測(cè)定，以蔓荊子黃素的峰面積積分值為縱坐標(biāo)，其濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：C=2.225×10-7A-4.72×10-4，r=0.9999，其線性范圍在0.015mg/ml—0.075mg/ml。

3、3 樣品的測(cè)定：精密稱取蔓荊子提取物25mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解，超聲振蕩，定容過(guò)濾，取續(xù)濾液，即為供試品溶液。照上述方法測(cè)定，計(jì)算含量即得。

3、4 回收率實(shí)驗(yàn)：精密稱取已知含量的蔓荊子提取物25mg，加入蔓荊子黃素對(duì)照品0.75mg，按照樣品測(cè)定項(xiàng)下進(jìn)行處理，測(cè)定，計(jì)算回收率：98.18%，RSD=1.46%。

3、5 精密度試驗(yàn)：在上述條件下，對(duì)同一濃度的對(duì)照品溶液連續(xù)6次進(jìn)樣，計(jì)算峰面積平均值，RSD為0.945%。

3、6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 按照樣品測(cè)定方法，對(duì)同一批號(hào)樣品進(jìn)行5次平行試驗(yàn)，蔓荊子黃素含量RSD為1.72%。

 三、小結(jié)

從我們對(duì)蔓荊子提取物的分離鑒定部分說(shuō)明，在蔓荊子提取物中根本就沒(méi)有牡荊素成分，而只有與之功效幾乎相同的蔓荊子黃素，同時(shí)，我們對(duì)蔓荊子提取物進(jìn)行高效液相分析，也沒(méi)有牡荊素的成分峰出現(xiàn)，所以現(xiàn)市場(chǎng)上走的蔓荊子提取物應(yīng)以蔓荊子黃素為指標(biāo)，在生產(chǎn)過(guò)程中也應(yīng)以蔓荊子黃素為有效成分來(lái)控制蔓荊子提取物的生產(chǎn)，這為以后的蔓荊子生產(chǎn)提供了依據(jù)。

 四、參考文獻(xiàn)

   [1]  吳永忠，朱良輝等，不同產(chǎn)地蔓荊子化學(xué)成分含量比較，中藥材，23（10），2000，616~619

   [2]  王坤等，蔓荊子的薄層鑒定，山東中醫(yī)雜志，18（2），1999，82~83