高效液相色譜儀直接分析氨基酸物質(zhì):
樣品:12種未衍生氨基酸混合物溶液(1mMol/L)
色譜儀:“上海吉理LC600”液相色譜儀,四元梯度泵
配有二極管陣列檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器和化學(xué)工作站
檢測器:500型ELSD蒸發(fā)光散射檢測器
漂移管溫度為95℃,氮?dú)饬魉?.5L/min
色譜柱:AlltimaC18,5μm,柱長25cm,柱徑4.6mm
流動相:A為含0.1%TFA的水
B為含0.1%TFA的乙腈
梯度:時間0min5min20min
A液100%100%60%
B液0%0%40%
流速:0.6mL/min
進(jìn)樣:20μL
結(jié)果:所有組分在25min之內(nèi)全部流出,各組分完全分離,組分流出順序?yàn)椋悍?為絲氨酸,峰2為賴氨酸,峰3為谷氨酸,峰4為精氨酸,峰5為脯氨酸,峰6為纈氨酸,峰7為甲硫氨酸,峰8為酪氨酸,峰9為異亮氨酸,峰10為亮氨酸,峰11為苯丙氨酸,峰12為組氨酸。
一、LC—P600型高壓恒流泵
柱塞桿采用浮動導(dǎo)向結(jié)構(gòu),驅(qū)動凸輪由高強(qiáng)度合金鋼制造。采用微處理器控制微步驅(qū)動電路,使得驅(qū)動泵的步進(jìn)電機(jī)運(yùn)行平穩(wěn)、噪聲低、速度調(diào)節(jié)范圍大。LC-P600高壓恒流泵在壓力為0~42Mpa的范圍內(nèi),流量可以從0.001mL/min開始到9.999mL/min。這樣滿足了常規(guī)分析到微流量分析的需要。
在單泵等度分析時,可根據(jù)該儀器上全漢字顯示液晶屏的提示語句,通過四個功能鍵就可變換各種操作模式,并且可以方便地設(shè)置流量、壓力上下限、持續(xù)工作時間、壓力單位等參數(shù)。
LC-P600高壓恒流泵具有過程監(jiān)測功能。微處理器實(shí)時控制泵的流量和檢測輸液壓力。在壓力超限的情況下,報警并自動停止泵的運(yùn)行。
可采用LC-WS100工作站,通過RS232接口,控制多達(dá)四臺泵的運(yùn)行,建立多元梯度分析系統(tǒng)。
LC-P600高壓恒流泵整體結(jié)構(gòu)采用模塊化設(shè)計,包括機(jī)械部分和電路部分都可以獨(dú)立裝拆,因此故障檢查和調(diào)換都非常方便。
LC-P600高壓恒流泵采用雙柱塞并聯(lián)泵結(jié)構(gòu),雙泵頭交替輸液。在同樣輸液量的情況下,它的輸出脈動要比串聯(lián)泵低得多,而活塞桿和密封圈壽命要比常規(guī)串聯(lián)泵長一倍。
二、LC—UV600型紫外檢測器
LC-UV600紫外檢測器采用了平行的雙錐孔流通池,樣品池和參照池完全處于對等的條件。錐孔設(shè)計的流通池,可以在同樣的池體積情況下,提高通過池孔的光能量,明顯降低了儀器的靜態(tài)噪音和信號漂移。
光路系統(tǒng)采用了精密定位結(jié)構(gòu),所以精度高、偏移小。氘燈座和光路系統(tǒng)采用熱隔離安裝技術(shù),降低了儀器的穩(wěn)定時間,并且使氘燈的發(fā)熱對光路系統(tǒng)的影響降到最低。
控制電路采用多微處理器結(jié)構(gòu),分別管理信號采集、數(shù)據(jù)處理、系統(tǒng)控制和通信。LC-UV600紫外檢測器在做等度分析時,可以方便地通過全漢字的液晶屏與七個功能鍵,設(shè)置紫外光波長、濾波常數(shù)、輸出量程、運(yùn)行時間等參數(shù)。并且可以實(shí)現(xiàn)開關(guān)氘燈、光譜掃描、啟動分析程序等功能。
該儀器的另一大特點(diǎn)是:LC-UV600紫外檢測器獨(dú)特地使用了數(shù)字信號直接輸出的線路結(jié)構(gòu)。相比以往的紫外檢測器色譜信號大多數(shù)采用模擬信號輸出或者是內(nèi)部數(shù)字信號處理后,再轉(zhuǎn)換成模擬信號輸出到色譜數(shù)據(jù)處理裝置,然后再經(jīng)過模數(shù)轉(zhuǎn)換。這樣多重的轉(zhuǎn)換勢必導(dǎo)致信號畸變和干擾。而LC-UV600紫外檢測器通過RS232接口將數(shù)字化信號毫無損失地送到LC-WS600工作站進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換和積分處理。
LC-UV600紫外檢測器可以通過LC-WS600工作站上的圖形化界面,方便地實(shí)現(xiàn)控制氘燈開關(guān)、光譜掃描、繼電器開關(guān)、波長掃描等功能。