在微生物檢測(cè)中常會(huì)遇到以下問(wèn)題,今天我們?yōu)槟д校屇p松解決這些問(wèn)題!
一、為什么劃不出單個(gè)菌落?
1、平板上有過(guò)多的水分;
2、在劃線時(shí)沒(méi)有反復(fù)灼燒接種環(huán);
3、多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線,越是稀釋到4區(qū),間距要越寬。
二、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題
1、嚴(yán)格控制滅菌溫度,需要按照要求進(jìn)行滅菌操作。如果培養(yǎng)基的含糖量較高,那么滅菌溫度就不能太高,否則就會(huì)使糖分焦化,從而影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
2、不能反復(fù)融化瓊脂培養(yǎng)基,這會(huì)對(duì)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞。
3、不能對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行反復(fù)滅菌,這同樣也會(huì)對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞作用。
4、在對(duì)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后需要將其充分搖勻。
5、需要將培養(yǎng)基完全溶解才能分裝培養(yǎng)基。
三、培養(yǎng)基的保存
1、平板:大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
2、干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。
3、亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時(shí),要常溫解凍,不能使用水浴加熱。
4、抗生素類:冷藏保存,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。
5、兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。
四、觀察時(shí)間的掌握
按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說(shuō)明所述時(shí)間進(jìn)行觀察,時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng),單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此,時(shí)間過(guò)長(zhǎng),李氏菌使整個(gè)平板成黑色,不利于觀察單個(gè)菌落。霉菌要3天后要及時(shí)觀察計(jì)數(shù),防止時(shí)間長(zhǎng)成一片。
五、添加劑的添加
1、溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
2、定量: 過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌,太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。
六、培養(yǎng)溫度的掌握
1、真菌類:25-28℃培養(yǎng)
2、細(xì)菌類:李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
3、其他一般在36℃左右
七、常用的接種方法
穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。
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一、為什么劃不出單個(gè)菌落?
1、平板上有過(guò)多的水分;
2、在劃線時(shí)沒(méi)有反復(fù)灼燒接種環(huán);
3、多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線,越是稀釋到4區(qū),間距要越寬。
二、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題
1、嚴(yán)格控制滅菌溫度,需要按照要求進(jìn)行滅菌操作。如果培養(yǎng)基的含糖量較高,那么滅菌溫度就不能太高,否則就會(huì)使糖分焦化,從而影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
2、不能反復(fù)融化瓊脂培養(yǎng)基,這會(huì)對(duì)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞。
3、不能對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行反復(fù)滅菌,這同樣也會(huì)對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞作用。
4、在對(duì)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后需要將其充分搖勻。
5、需要將培養(yǎng)基完全溶解才能分裝培養(yǎng)基。
三、培養(yǎng)基的保存
1、平板:大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
2、干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。
3、亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時(shí),要常溫解凍,不能使用水浴加熱。
4、抗生素類:冷藏保存,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。
5、兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。
四、觀察時(shí)間的掌握
按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說(shuō)明所述時(shí)間進(jìn)行觀察,時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng),單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此,時(shí)間過(guò)長(zhǎng),李氏菌使整個(gè)平板成黑色,不利于觀察單個(gè)菌落。霉菌要3天后要及時(shí)觀察計(jì)數(shù),防止時(shí)間長(zhǎng)成一片。
五、添加劑的添加
1、溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
2、定量: 過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌,太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。
六、培養(yǎng)溫度的掌握
1、真菌類:25-28℃培養(yǎng)
2、細(xì)菌類:李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
3、其他一般在36℃左右
七、常用的接種方法
穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。
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