一、采樣設備和材料
采樣工具
采樣工具應使用不銹鋼或其他強度適當?shù)牟牧,表面光滑,無縫隙,邊角圓潤。采樣工具應清洗和滅菌,使用前保持干燥。采樣工具包括攪拌器具、采樣勺、匙、切割絲、刀具(小刀或抹刀)、采樣鉆等。
樣品容器
樣品容器的材料(如玻璃、不銹鋼、塑料等)和結(jié)構(gòu)應能充分保證樣品的原有狀態(tài)。容器和蓋子應清潔、無菌、干燥。樣品容器應有足夠的體積,使樣品可在測試前充分混勻。樣品容器包括采樣袋、采樣管、采樣瓶等。
其他用品
包括溫度計、鋁箔、封口膜、記號筆、采樣登記表等。
二、采樣方案
樣品應當具有代表性。采樣過程采用無菌操作,采樣方法和采樣數(shù)量應根據(jù)具體產(chǎn)品的特點和產(chǎn)品標準要求執(zhí)行。樣品在保存和運輸?shù)倪^程中,應采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化,保持樣品的原有狀態(tài)。
(n:同一批次產(chǎn)品應采集的樣品件數(shù),按具體產(chǎn)品要求執(zhí)行,乳及乳制品一般是5個。)
1
生乳的采樣
樣品應充分攪拌混勻,混勻后應立即取樣,用無菌采樣工具分別從相同批次(此處特指單體的貯奶罐或貯奶車)中采集n個樣品,采樣量應滿足微生物指標檢驗的要求。
具有分隔區(qū)域的貯奶裝置,應根據(jù)每個分隔區(qū)域內(nèi)貯奶量的不同,按比例從中采集一定量經(jīng)混合均勻的代表性樣品,將上述奶樣混合均勻采樣。
2
液態(tài)乳制品的采樣
適用于巴氏殺菌乳、發(fā)酵乳、滅菌乳、調(diào)制乳等。
取相同批次最小零售原包裝,每批至少取n件。
3
半固態(tài)乳制品的采樣
3.1 煉乳的采樣
適用于淡煉乳、加糖煉乳、調(diào)制煉乳等。
原包裝小于或等于500 g(mL)的制品:取相同批次的最小零售原包裝,每批至少取n件。采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
原包裝大于500 g(mL)的制品(再加工產(chǎn)品,進出口):采樣前應搖動或使用攪拌器攪拌,使其達到均勻后采樣。
如果樣品無法進行均勻混合,就從樣品容器中的各個部位取代表性樣。采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
3.2 奶油及其制品的采樣
適用于稀奶油、奶油、無水奶油等。
原包裝小于或等于1000 g(mL)的制品:取相同批次的最小零售原包裝,采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
原包裝大于1000 g(mL)的制品:采樣前應搖動或使用攪拌器攪拌,使其達到均勻后采樣。
對于固態(tài)制品,用無菌抹刀除去表層產(chǎn)品,厚度不少于5 mm。將潔凈、干燥的采樣鉆沿包裝容器切口方向往下,勻速穿入底部。
當采樣鉆到達容器底部時,將采樣鉆旋轉(zhuǎn)180°,抽出采樣鉆并將采集的樣品轉(zhuǎn)入樣品容器。采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
4
固態(tài)乳制品采樣
4.1 干酪與再制干酪的采樣
原包裝小于或等于500 g的制品:取相同批次的最小零售原包裝,采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
原包裝大于500 g的制品:根據(jù)干酪的形狀和類型,可分別使用下列方法:
(1)在距邊緣不小于10 cm處,把取樣器向干酪中心斜插到一個平表面,進行一次或幾次。
(2)把取樣器垂直插入一個面,并穿過干酪中心到對面。
(3)從兩個平面之間,將取樣器水平插入干酪的豎直面,插向干酪中心。
(4)若干酪是裝在桶、箱或其它大容器中,或是將干酪制成壓緊的大塊時,將取樣器從容器頂斜穿到底進行采樣。采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
4.2 乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉的采樣
適用于乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉等。
原包裝小于或等于500 g的制品:取相同批次的最小零售原包裝,采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
原包裝大于500 g的制品:將潔凈、干燥的采樣鉆沿包裝容器切口方向往下,勻速穿入底部。當采樣鉆到達容器底部時,將采樣鉆旋轉(zhuǎn)180°,抽出采樣鉆并將采集的樣品轉(zhuǎn)入樣品容器。采樣量不小于5倍或以上檢驗單位的樣品。
五、檢樣的處理
5.1
乳及液態(tài)乳制品的處理
將檢樣搖勻,以無菌操作開啟包裝。
塑料或紙盒(袋)裝,用75 %酒精棉球消毒盒蓋或袋口,用滅菌剪刀切開;
玻璃瓶裝,以無菌操作去掉瓶口的紙罩或瓶蓋,瓶口經(jīng)火焰消毒。
用滅菌吸管吸取25 mL(液態(tài)乳中添加固體顆粒狀物的,應均質(zhì)后取樣)檢樣,放入裝有225 mL滅菌生理鹽水的錐形瓶內(nèi),振搖均勻。
5.2
半固態(tài)乳制品的處理
5.2.1 煉乳
清潔瓶或罐的表面,再用點燃的酒精棉球消毒瓶或罐口周圍,然后用滅菌的開罐器打開瓶或罐,以無菌手續(xù)稱取25 g檢樣, 放入預熱至45 ℃的裝有225 mL滅菌生理鹽水(或其他增菌液)的錐形瓶中,振搖均勻。
5.2.2 稀奶油、奶油、無水奶油等
無菌操作打開包裝,稱取25 g檢樣, 放入預熱至45 ℃的裝有225 mL滅菌生理鹽水(或其他增菌液)的錐形瓶中,振搖均勻。從檢樣融化到接種完畢的時間不應超過30 min。
5.3
固態(tài)乳制品的處理
5.3.1 干酪及其制品
以無菌操作打開外包裝,對有涂層的樣品削去部分表面封蠟,對無涂層的樣品直接經(jīng)無菌程序用滅菌刀切開干酪,用滅菌刀(勺)從表層和深層分別取出有代表性的適量樣品,磨碎混勻。
稱取25 g檢樣,放入預熱到45℃的裝有225 mL滅菌生理鹽水(或其他稀釋液)的錐形瓶中,振搖均勻。充分混合使樣品均勻散開(1 min~3 min),分散過程時溫度不超過40 ℃。盡可能避免泡沫產(chǎn)生。
5.3.2 乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉
取樣前將樣品充分混勻。
罐裝乳粉的開罐取樣法同煉乳處理,袋裝奶粉應用75%酒精的棉球涂擦消毒袋口, 以無菌手續(xù)開封取樣。
稱取檢樣25 g,加入預熱到45 ℃盛有225 mL滅菌生理鹽水等稀釋液或增菌液的錐形瓶內(nèi)(可使用玻璃珠助溶),振搖使充分溶解和混勻。
對于經(jīng)酸化工藝生產(chǎn)的乳清粉,應使用pH 8.4±0.2的磷酸氫二鉀緩沖液稀釋。
對于含較高淀粉的特殊配方乳粉,可使用α-淀粉酶降低溶液粘度,或?qū)⑾♂屢杭颖兑越档腿芤赫扯取?/span>
5.3.3 酪蛋白和酪蛋白酸鹽
以無菌操作,稱取25 g檢樣,按照產(chǎn)品不同,分別加入225 mL滅菌生理鹽水等稀釋液或增菌液。
在對粘稠的樣品溶液進行梯度稀釋時,應在無菌條件下反復多次吹打吸管,盡量將粘附在吸管內(nèi)壁的樣品轉(zhuǎn)移到溶液中。
5.3.3.1 酸法工藝生產(chǎn)的酪蛋白:使用磷酸氫二鉀緩沖液并加入消泡劑,在pH 8.4±0.2的條件下溶解樣品。
5.3.3.2 凝乳酶法工藝生產(chǎn)的酪蛋白:使用磷酸氫二鉀緩沖液并加入消泡劑,在pH 7.5±0.2的條件下溶解樣品,室溫靜置15 min。必要時在滅菌的勻漿袋中均質(zhì)2 min,再靜置5 min后檢測。
5.3.3.3 酪蛋白酸鹽:使用磷酸氫二鉀緩沖液在pH 7.5±0.2的條件下溶解樣品。
六、檢驗設備與用品
按GB 4789.1執(zhí)行
檢驗設備:
稱量設備:天平等。
消毒滅菌設備:干烤/干燥設備,高壓滅菌、過濾除菌、紫外線等裝置。
培養(yǎng)基制備設備:pH 計等。
樣品處理設備:均質(zhì)器(剪切式或拍打式均質(zhì)器)、離心機等。
稀釋設備:移液器等。
培養(yǎng)設備:恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴等裝置。
鏡檢計數(shù)設備:顯微鏡、放大鏡、游標卡尺等。
冷藏冷凍設備:冰箱、冷凍柜等。
生物安全設備:生物安全柜。
其他設備。
檢驗用品
常規(guī)檢驗用品:接種環(huán)(針)、酒精燈、鑷子、剪刀、藥匙、消毒棉球、硅膠(棉)塞、吸管、吸球、試管、平皿、錐形瓶、微孔板、廣口瓶、量筒、玻棒及 L形玻棒、pH 試紙、記號筆、均質(zhì)袋等。
七、檢驗方法
菌落總數(shù):按GB 4789.2檢驗。
大腸菌群:按GB 4789.3中的直接計數(shù)法計數(shù)。
沙門氏菌:按GB 4789.4檢驗。
金黃色葡萄球菌:按GB 4789.10檢驗。
霉菌和酵母:按GB 4789.15計數(shù)。
單核細胞增生李斯特氏菌:按GB 4789.30檢驗。
雙歧桿菌:按GB/T 4789.34檢驗。
乳酸菌:按GB 4789.35檢驗。
阪崎腸桿菌:按GB 4789.40檢驗。