1.6菌種保存

所有菌種均由實驗室專人(雙人雙鎖)保存于專用冰箱或其它保存方式。要建立菌種登記臺帳，詳細記錄菌種采集、保管、制備、使用、處置情況；每一種菌種一定要有檢測鑒定報告（具體的的鑒定方法見菌種質(zhì)量報告鑒定證書上的方法）；

具體菌種保存方法一般為：

將復(fù)蘇后肉湯與滅菌甘油按15%甘油比例（肉湯8.5mL+甘油1.5mL）混合，-30 ℃凍存，（可用2mL凍存管凍存多管），作為保藏儲備菌株F1代，也可使用商品化的菌種保存管。

1.7菌種的傳代

1.7.1標準菌株的復(fù)蘇：

① 菌種操作應(yīng)在無菌條件下進行，防止雜菌污染。

② 每次使用和復(fù)蘇時只需將小珠在平板上滾動或置肉湯中培養(yǎng)。

1.7.2標準儲備菌株每轉(zhuǎn)接一次須進行確認。（確認方法一般為他們各自獨有的形態(tài)，在鑒別培養(yǎng)基上的形態(tài)）

1.7.3工作菌株轉(zhuǎn)接的方法：

①、配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（溶血性弧菌加3%氯化鈉 ），121℃高壓滅菌15分鐘后分裝在試管內(nèi)，冷卻后備用。

②、在無菌條件下，用接種環(huán)挑取菌苔至新鮮試管上作“米”字形劃線接種，放置在36℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時。

1.7.4工作菌株的使用

1.7.4.1內(nèi)部質(zhì)量控制：一個月一次陽性對照、培養(yǎng)基每批驗收；

1.7.4.2外部質(zhì)量控制：能力驗證、實驗室比對；

1.7.5工作菌株的期間核查

1.7.5.1期間核查的頻率：每半年對使用標準菌株進行一次期間核查。

1.7.5.2工作菌株期間核查的方法及依據(jù)：同工作菌株的確認一樣。

1.7.5.3建立標準菌株期間核查記錄。

1.8菌種的標識和使用期限：

1.8.1標識：菌種代數(shù)的計算為干粉菌種為第0代，轉(zhuǎn)接一次加一代。具體標識為：例單增李斯特氏菌第0代，標識為DZ-0，第一代標識為DZ-01第一代有12支，則DZ-01-01、……、DZ-01-12；并標明日期：如2016.02.13這樣填寫。

1.9 菌種的保藏

1.9.1將試管內(nèi)菌種放入冰箱中2～8℃冷藏保存。

1.9.2將傳代并經(jīng)過培養(yǎng)后的菌種放入冰箱中2～8℃保存。每支保存菌種需標明菌名、標準編號、傳次、傳代日期。

1.10菌種的銷毀

1.10.1菌種使用后或超過貯存期的應(yīng)進行銷毀。

1.10.2需銷毀的菌種，應(yīng)用高壓蒸汽（121℃）滅菌30分鐘。

1.10.3滅菌后，再進行清洗和處理。

1.10.4銷毀的菌種應(yīng)做好記錄。銷毀時由化驗負責人監(jiān)督銷毀，保管人員負責銷毀。