吡拉西坦葡萄糖注射液是國(guó)家四類(lèi)新藥，為腦代謝改善藥，用于腦動(dòng)脈硬化癥及腦血管意外所致的記憶和思維功能減退的治療。其前期質(zhì)量研究工作中沒(méi)有涉及有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)和控制，為了保證生產(chǎn)和儲(chǔ)備過(guò)程中產(chǎn)品的質(zhì)量，筆者對(duì)吡拉西坦葡萄糖注射液有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了全面考察，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料儀器與試藥：美國(guó)Agilent 1100高效液相色譜儀；Agilem 1100系列紫外多波長(zhǎng)檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、四元泵、真空脫氣機(jī)，Agilent 1 100化學(xué)工作站；KQ3200超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；SYZ-550石英亞沸高純水蒸餾器(江蘇省金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠)；乙腈為色譜純；水為重蒸餾水；吡拉西坦注射葡萄糖液(批號(hào)031021N、031022、031023)由本公司制劑室提供。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

    1.2.1 色譜條件 色譜柱：ODS柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動(dòng)相：水；流速：1.3ml／min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：2Oμl。

    1.2.2 流動(dòng)相的選擇和最佳檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 (1)流動(dòng)相的選擇：曾選用甲醇-乙腈-水、甲醇-水等分離吡拉西坦，但主峰的保留時(shí)間較短，對(duì)主要降解產(chǎn)物5-羥甲基糠醛進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)與主峰分離不完全，影響主藥含量測(cè)定，故改用水作流動(dòng)相進(jìn)行檢測(cè)，在此條件下，5-羥甲基糠醛保留時(shí)間約在2min，而主藥的保留時(shí)間約在11min 并對(duì)專(zhuān)屬性進(jìn)行考察，破壞試驗(yàn)的降解產(chǎn)物保留時(shí)間均不影響主藥的含量測(cè)定。雜質(zhì)峰可得到較好地分離和檢測(cè)。(2)檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇：吡拉西坦在含量測(cè)定濃度下，在2OO～400nm 的紫外掃描圖顯示，其在220.5nm處有最大吸收，故選擇220nm。

    1.2.3 輔料影響試驗(yàn) 精密稱(chēng)取葡萄糖5.0g置100ml量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，制成與吡拉西坦葡萄糖注射葡萄糖濃度相當(dāng)?shù)娜芤�；取此溶�?ml置250ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取2Oμl注入液相色譜儀，記錄HPLC檢測(cè)圖譜，結(jié)果表明：在選定的液相色譜條件下處方量的葡萄糖對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

    1.2.4 專(zhuān)屬性試驗(yàn) (1)高溫破壞；分別稱(chēng)取吡拉西坦原料160mg 2份于5Oml量瓶中，1份在120℃烘烤2.5h，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)行HPLC檢測(cè)；主要降解產(chǎn)物保留時(shí)間約為2.0 min。另1份加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，在6O℃加熱4 h，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，主要降解產(chǎn)物保留時(shí)間約為2.0min，檢測(cè)結(jié)果降解產(chǎn)物與主藥分離較好，互不干擾測(cè)定。(2)酸破壞：稱(chēng)取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加0.1mol／LHCL溶液1ml，溶解，在60℃加熱2h，加水稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，主要降解產(chǎn)物的保留時(shí)間約為4.2min，檢測(cè)結(jié)果降解產(chǎn)物與主藥分離較好，互不干擾測(cè)定。(3)堿破壞：稱(chēng)取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中．加0.1mol／1Na0H溶液1ml，溶解，在6O℃加熱2 h，加水稀釋至刻度，搖勻。進(jìn)行HPLC檢測(cè)。主要降解產(chǎn)物的保留時(shí)間約為2.1min和2.4 min，檢測(cè)結(jié)果降解產(chǎn)物與主藥分離較好．互不干擾測(cè)定。(4)氧化破壞：稱(chēng)取吡拉西坦原料160mg于5Oml量瓶中，加3O%H2O2溶液0.1ml，溶解，在60℃加熱0.5h，加水稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)行HPLC檢測(cè)，主要降解產(chǎn)物的保留時(shí)間約為2.0min和2.4min，檢測(cè)結(jié)果降解產(chǎn)物與主藥分離較好，互不干擾測(cè)定，并說(shuō)明吡拉西坦極易被氧化。

    1.2.5 測(cè)定方法回收率試驗(yàn) 取乙酰胺毗咯烷酮對(duì)照品約26、32、38mg，精密稱(chēng)定，分置于1Oml量瓶中，并按處方比加入葡萄糖，用水溶解，稀釋至刻度，搖勻。精密量取1ml置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為樣品溶液，濃度分別為26μg／ml、32μg／ml、38μg／ml；另精密稱(chēng)取乙酰胺吡咯烷酮對(duì)照品適量，用水配制成濃度為32μg／ml的對(duì)照溶液。分別精密吸取上述樣品溶液和對(duì)照溶液2Oμl。注入色譜儀，記錄峰面積，計(jì)算回收率。結(jié)果表明在99.9～100.1之間，并且RSD值均小于0.5 。

    1.2.6 樣品的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定 精密量取本品1ml置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試溶液；精密移取1ml置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。精密量取對(duì)照溶液2Oμl注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)試，調(diào)整檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰達(dá)滿標(biāo)的1O％～2O％；再精密量取供試液2Oμl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的2倍，計(jì)算各雜質(zhì)峰面積的和，不得大于對(duì)照峰面積(1％)。

    2 討論

    在方法專(zhuān)屬性考察中，主要降解產(chǎn)物的保留時(shí)間約為2.0、2.1、2.4和4.2min，降解產(chǎn)物與主藥分離較好，互不干擾測(cè)定，但目前尚未確定各降解產(chǎn)物的成分，這方面工作將進(jìn)一步進(jìn)行研究。在專(zhuān)屬性考察中發(fā)現(xiàn)，吡拉西坦極易被氧化，所以在檢驗(yàn)操作中應(yīng)予以注意。

【參 考 文 獻(xiàn) 】

[1] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì)．中國(guó)藥典[3]．Ⅱ部．北京化學(xué)工業(yè)出版社，2000．附錄：191．