作為從事微生物檢測的一員,每天在實驗室里,我們需要跟各種檢測方法、細菌真菌以及檢測設備等打交道,對微生物檢測領域也肯定會存在這樣或者那樣的問題,面對這些問題你是怎么解決的?你有哪些好的微生物檢測工作經(jīng)驗?都可以在后臺給小編留言,我們一起聊聊。
轉眼間,(2016版)4789系列標準已經(jīng)實施近5個年頭啦,雖然還有一個GB/T 4789.3-2003頑強的存在著。今天和大家在一起聊聊我對4789系列國標(常規(guī)微生物方面)的理解,純屬個人+他人觀點,如有雷同,那就對了!
首先來談一下總則GB 4789.1,很多小伙伴“一入坑”就上手菌落總數(shù)、大腸菌群等衛(wèi)生指標菌的檢測,而忽視了這些檢驗的基礎及原則,經(jīng)常會有微信群好友問“n、c、m、M是什么意思”類似的問題,也看得到群里的大佬們的悉心解答,總感覺我們解答的人比他們自己都要急切地讓他們明白。
《GB 4789.1-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 總則》 理解
總則正文第一句話,“本標準規(guī)定了食品微生物學檢驗基本原則和要求”,已經(jīng)很明確的告訴我們檢驗基本原則和要求就在這,你們快來看吧!然后標準從基本要求、樣品采集、檢驗、生物安全和質量控制、記錄與報告、檢樣后處理幾個方面展開了詳細的內容。基本要求即為“人、機、料、法、環(huán)”五大要素,也是實驗室質量控制的切入點。
樣品采集中規(guī)定了采樣方案,目前大多數(shù)產(chǎn)品標準也都規(guī)定選取三級采樣方案,為什么采取n、c、m等值呢,這是在跟國際接軌呀,雖然說三級采樣使得化驗員工作量增加了,但是要求更嚴格,企業(yè)為了更好的質量更規(guī)范的生產(chǎn),也從另一反面增加了食品安全系數(shù)。然后就是檢驗過程,對應一系列的檢驗標準啦。
標準最后規(guī)定了“剩余樣品和同批產(chǎn)品不進行微生物項目的復檢”,為什么呢,微生物的分部可謂極不規(guī)則,即使是同一樣品的不同部位,也無法保證它微生物檢驗的重復性,更何況是不同的樣品呢,故而即使復檢,所得結果也不具有參考價值。
《GB 4789.2-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》理解
然后來看GB 4789.2,作為大多數(shù)產(chǎn)品的衛(wèi)生指示菌,菌落總數(shù)的測定相信是很多新手的“第一道菜”。除了總則規(guī)定的基本要求外,此標準規(guī)定了檢驗程序,檢驗設備,計數(shù)方法和報告方式等。
檢驗程序估計大家都能倒背如流了,就不多贅述了,主要說說個人對這幾點的理解。制備梯度稀釋液時,磷酸鹽緩沖液可以更好得調節(jié)樣液的pH,減少樣液pH的不穩(wěn)定帶來的影響。
然后是培養(yǎng),一般要求實驗開始到傾注平板在15min內進行,可有效減少污染;還有,如果某個產(chǎn)品做出來總是有菌落蔓延的情況,那么可以采用二次覆蓋法來避免此類情況。
最后,計數(shù)和報告,規(guī)定選取菌落數(shù)在30-300之間的平板進行計數(shù),例如,10倍和100倍稀釋度平板菌落數(shù)分別為271,283,25,34,結果計算式為(271+283+34)/【(2+0.1*1)*10-1】。報告方式,微生物檢驗均采取“四舍五入”的修約規(guī)則,小于100時,以整數(shù)報告,大于100時以科學計數(shù)法保留兩位有效數(shù)字,或修約后取前兩位,其余以0代替。
《GB4789.3-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸菌群計數(shù)》 理解
接著來看同為衛(wèi)生指標菌——大腸菌群的檢測GB4789.3,在以往的MPN法外又增加了平板計數(shù)法,由于公司產(chǎn)品大多采用平板計數(shù)法,所以探討下平板計數(shù)及證實試驗的細節(jié)。
梯度稀釋,同菌落總數(shù),傾注VRBA培養(yǎng)后續(xù)觀察菌落特征進行證實試驗,BGLB肉湯管產(chǎn)氣即可報告為陽性,一般伴隨產(chǎn)氣,還會有沉淀、液面有漂浮小氣泡的現(xiàn)象。
關于接種挑菌的說法,參加過多次培訓,也是各執(zhí)己見,分享下比較認可的其中一種:分別計數(shù)某稀釋度2個平皿的典型菌落和可疑菌落數(shù),每個平皿都挑取10個菌進行接種,10個菌的選取按典型和可疑菌落的比例進行,如典型:可疑為21:46,則挑取比例為:3:7。復發(fā)酵后分別計算兩個平皿的結果,再求取平均值作為該稀釋度的大腸菌群報告值。
好了,今天的分享就到這里,文章觀點只是個人的建議,僅供參考。同時歡迎小伙伴們踴躍投稿,分享自己在檢測過程中的經(jīng)驗。
來源:食品論壇網(wǎng)友原創(chuàng)分享,小編整理編輯。