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建立培養(yǎng)基適用性檢查操作規(guī)程，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
二、適用范圍：
本規(guī)程規(guī)定了培養(yǎng)基適用性檢查方法和操作要求，適用于微生物實(shí)驗(yàn)室計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基、控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查。
三、內(nèi)容：
1、簡(jiǎn)述
1.1 培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)可用于確定實(shí)驗(yàn)室所使用培養(yǎng)基(包括購(gòu)置的不同批號(hào)的成品培養(yǎng)基、不同批號(hào)的脫水培養(yǎng)基、按處方自行配制培養(yǎng)基所用不同批次的原材料等)、制備程序（包括水質(zhì)控制、配制方法、滅菌程序等）、保存條件（溫度、濕度、時(shí)間及盛裝培養(yǎng)基的容器條件等）等是否滿足微生物限度檢查要求。
1.2 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查包括需氧菌、霉菌及酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)。
1.3 控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示特性的檢查。
2 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查
微生物限度檢查中計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基有5種，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂培養(yǎng)基、平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。
2.1 培養(yǎng)基及配制
2.1.1 培養(yǎng)基：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基；R2A瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基；平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。
2.1.2 配制：照《培養(yǎng)基配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》配制。
2.2 試劑及稀釋劑配制
2.2.1 試劑：pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液、聚山梨酯80、氯化鈉。
2.2.2 稀釋劑配制
Ø pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：稱取pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液14.63g,加水1000mL溶解，分裝，滅菌（121℃、15min）。
Ø 0.05％（mL/mL）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取已經(jīng)滅菌好的聚山梨酯80（1mL），加入pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，搖勻，即得。
Ø 0.9％無菌氯化鈉溶液：稱取氯化鈉9.0g，加水溶解使成1000mL，分裝，滅菌（121℃、15min）。
3 試劑及消毒液配制
3.1 試劑
新潔爾滅溶液、84消毒液、苯酚、75％醫(yī)用消毒酒精。
3.2 消毒液配制
3.2.1 84消毒液：取84消毒液1ml，加水60ml(1：60)，搖勻即得。
3.2.2 0.1％新潔爾滅溶液：取新潔爾滅溶液20.4ml，加水至1000ml，搖勻，即得。
3.2.3 5％的苯酚溶液：稱取苯酚5g，加水至100ml,搖勻，即得。
3.2.4 75％酒精棉球：取滅菌脫脂棉撕成小塊并揉捏成團(tuán)，置于廣口瓶?jī)?nèi)，加入75% 醫(yī)用消毒酒精，充分浸潤(rùn)，即得。
4 試驗(yàn)用菌株及菌液制備
4.1 試驗(yàn)用菌株
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）［CMCC(B)26003］
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）［CMCC(B)10104］
枯草芽孢桿菌（Bacillus s aureus）［CMCC(B)63501］
白色念珠菌（Candida albicans）［CMCC(F)98001］
黑曲霉（Aspergillus niger）［CMCC(F)98003］
4.2 菌液制備
4.2.1 儀器與用具
Ø 儀器：生化培養(yǎng)箱（30～35℃）、霉菌培養(yǎng)箱（20～25℃）、恒溫水浴鍋。
Ø用具：酒精燈、打火機(jī)、吸耳球、試管架、大試管（20×200mm、15×200mm）、錐形瓶、硅膠塞、刻度吸管（1mL、2mL、5mL/10mL）、吸管桶、接種環(huán)、培養(yǎng)皿（90mm）、不銹鋼培養(yǎng)皿桶、不銹鋼吸管桶、玻璃專用筆。
5 菌液制備方法
5.1 金黃色葡萄球菌菌液制備方法
5.1.1 用無菌接種取金黃色葡萄球菌斜面中底部菌落一環(huán)，在裝有pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液10mL的試管內(nèi)壁上輕輕摩擦，使環(huán)上的菌苔全部洗于溶液中，振搖混勻。
5.1.2 用1ml無菌吸管吸取上述均勻菌液0.1mL加入裝有9.9mL pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級(jí)。
5.1.3 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的菌懸液，備用。
5.2 枯草芽孢桿菌菌液制備方法
照金黃色葡萄球菌菌液制備方法同法操作。
5.3銅綠假單胞菌菌液制備方法
照金黃色葡萄球菌菌液制備方法同法操作。
5.4 白色念珠菌菌液制備方法。
5.4.1 用無菌接種取白色念珠菌斜面中底部菌落一環(huán)，在裝有pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液10ml的試管內(nèi)壁上輕輕摩擦，使環(huán)上的菌苔全部洗于溶液中，振搖混勻。
5.4.2 用1ml無菌吸管吸取上述均勻菌液0.1ml加入裝有9.9ml pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級(jí)。
5.4.3 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的菌懸液，備用。
5.5 黑曲霉液制備方法
5.5.1 取黑曲霉的斜面一支，加入20ml含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液于上述斜面培養(yǎng)物中，將孢子洗脫。
5.5.2 用管口帶有薄的無菌棉花的無菌吸管吸出全部孢子懸液，裝入另外一支無菌試管中，混勻，作為原液。
5.5.3 用1ml無菌吸管從試管中吸取0.1ml至另一支裝有9.9mlpH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級(jí)。
5.5.4 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的孢子懸液，備用。
5.6 注意事項(xiàng)
5.6.1 每一稀釋級(jí)，均需制備2個(gè)菌數(shù)計(jì)數(shù)平皿。（每一稀釋級(jí)取2個(gè)無菌平皿，每皿接種1ml菌液，銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固后于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24h，計(jì)數(shù)；白色念珠菌、黑曲霉傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，混勻，凝固后于20～25℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)96h，計(jì)數(shù)。
5.6.2 每遞增一稀釋級(jí)，必須另?yè)Q一支吸管。
5.6.3 稀釋時(shí)，吸管插入上一級(jí)試管內(nèi)不低于液面2.5cm，反復(fù)吸吹數(shù)次。
5.6.4 吸液時(shí)，應(yīng)先吸至高于吸管刻度上部少許，然后提起吸管，貼于試管內(nèi)壁調(diào)整液量至刻度，吸管移至下一稀釋試管的內(nèi)壁近液面處（切勿接觸液面）緩慢地放出全部試液。
5.6.5 所用稀釋菌液吸管均需放入裝有5％苯酚溶液的消毒缸內(nèi)，24小時(shí)后才能洗滌。
5.6.6 菌懸液制備后，若在室溫下放置應(yīng)在2h內(nèi)使用，若在2～8℃冰箱保存的菌懸液可以在24h內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可在2～8℃冰箱保存，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。
6 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基的適用性檢查
6.1 實(shí)驗(yàn)操作
6.1.1 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基
Ø 接種方法
分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20ml胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查
將接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過3天；將接種白色念珠菌、黑曲霉的培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于20～25℃培養(yǎng)不超過5天。
6.1.2 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
Ø 接種方法
分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20ml沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查
將接種白色念珠菌、黑曲霉培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于20～25℃培養(yǎng)不大于5天。
6.1.3 R2A瓊脂培養(yǎng)基
Ø 接種方法
分別接種不大于100cfu的銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20mlR2A瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查
將接種銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不大于3天。
6.1.5 平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基
Ø 接種方法
分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約15ml該培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查
將接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過3天；將接種白色念珠菌、黑曲霉的培養(yǎng)皿、對(duì)照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過5天
6.2 觀察與計(jì)算
Ø 觀察被檢培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落形態(tài)、大小與對(duì)照培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落形態(tài)、大小是否一致。
Ø 依次計(jì)算被檢培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿、白色念珠菌、黑曲霉的菌落平均數(shù)的比值。
6.3 結(jié)果與判斷
Ø 若被檢固體上的菌落數(shù)平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基菌落數(shù)平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5～2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致，各菌適用性檢查符合規(guī)定。
Ø 若被檢固體上的菌落數(shù)平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基菌落數(shù)平均數(shù)的比值低于0.5～2范圍，且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落不一致，則判斷該培養(yǎng)基的適用性查不符合規(guī)定。
7 控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查
控制菌檢查用培養(yǎng)基有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
7.1 培養(yǎng)基及制備
Ø 培養(yǎng)基：脫水培養(yǎng)基、對(duì)照用培養(yǎng)基。
Ø 制備：照培養(yǎng)基配制規(guī)程新鮮配制。
7.2 試驗(yàn)用菌株及菌液制備
Ø 試驗(yàn)用菌株
大腸埃希菌（Escherichia coli）［CMCC(B)44102］
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）［CMCC(B)26003］
枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）[CMCCB(B)63501]
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）［CMCC(B)10104］
沙門菌（Salmonella paratyphi B）［CMCC(B)50094］
白色念珠菌（Candida albicans）［CMCC(F)98001］
7.3 控制菌檢查用培養(yǎng)基需要測(cè)試的能力及判斷指標(biāo)
7.3.1 液體培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基比較，被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌應(yīng)生長(zhǎng)良好，表現(xiàn)為液體培養(yǎng)基變渾濁。
Ø 指示特性檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基管比較，被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌生長(zhǎng)情況/指示劑反映情況應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。
Ø 抑制能力檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最長(zhǎng)培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長(zhǎng)。
7.3.2 固體培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不大于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃或（42～44℃））及最短培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基比較，被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)一致。
Ø 指示特性檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不大于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基上試驗(yàn)菌的菌落形態(tài)特征、菌落顏色及指示劑反應(yīng)情況應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。
Ø 抑制能力檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不少于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最長(zhǎng)培養(yǎng)基時(shí)間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長(zhǎng)。
7.4 培養(yǎng)基能力測(cè)試列表
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查項(xiàng)目、菌株及判斷指標(biāo)
|
培養(yǎng)基 |
測(cè)試菌株 |
測(cè)試特性 |
測(cè)試指標(biāo) |
|
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基 |
銅綠假單胞菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
金黃色葡萄球菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
|
枯草芽孢桿菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
|
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 |
白色念珠菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基 |
沙門菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
金黃色葡萄球菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
麥康凱液體培養(yǎng)基 |
大腸埃希菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
金黃色葡萄球菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 |
大腸埃希菌 |
促生長(zhǎng)能力 +指示特性 |
大小顏色形態(tài)同對(duì)照 |
|
木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基 |
沙門菌 |
促生長(zhǎng)能力 +指示能力 |
大小顏色形態(tài)同對(duì)照 |
|
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基 |
沙門菌 |
指示能力 |
大小顏色形態(tài)、指示 劑反應(yīng)同對(duì)照 |
|
甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 |
金黃色葡萄球菌 |
促生長(zhǎng)能力 +指示特性 |
大小顏色形態(tài)同對(duì)照 |
|
大腸埃希菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
溴化十六烷基三甲銨瓊脂 |
銅綠假單胞菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
大小顏色形態(tài)同對(duì)照 |
|
大腸埃希菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
腸道增菌液體培養(yǎng)基 |
大腸埃希菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
銅綠假單胞菌 |
促生長(zhǎng)能力 |
渾濁 |
|
|
金黃色葡萄球菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
念珠菌顯色培養(yǎng)基 |
白色念珠菌 |
促生長(zhǎng)能力 +指示能力 |
大小顏色形態(tài)、指示 劑同對(duì)照 |
|
大腸埃希菌 |
抑制能力 |
不得生長(zhǎng) |
|
|
MUG培養(yǎng)基 |
大腸埃希菌 |
促生長(zhǎng)能力 +指示能力 |
大小顏色形態(tài)、指示 劑同對(duì)照 |
7.5 實(shí)驗(yàn)操作
7.5.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：分別接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌懸液于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查：30～35℃培養(yǎng)不超過3天。
7.5.2 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：接種白色念珠菌于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。
Ø 適用性檢查：20～25℃培養(yǎng)不超過3天。
7.5.3 RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。
適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基管
比較。
7.5.4 麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。
適用性檢查：在42～44℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基
中。
Ø 適用性檢查：在42～44℃條件下培養(yǎng)24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。
7.5.5 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查
Ø 促生長(zhǎng)能力+指示特性的檢查
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。
7.5.6 木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力+指示特性的檢查
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。
7.5.7 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基、
Ø 指示能力
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基高層斜面上，便進(jìn)行穿刺。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。
7.5.8 甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力+指示特性的檢查
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基比較。
7.5.9 溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：用涂布法接種不大于100cfu的銅綠假單胞菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)
基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對(duì)照培養(yǎng)基比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基比較。
7.5.10 腸道菌增菌液體培養(yǎng)
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌、銅綠假單胞菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。
7.5.12 平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培
養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基比較。
7.5.13 念珠菌顯色培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培
養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基比較。
Ø 抑制能力檢查
接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基比較。
7.5.14 MUG培養(yǎng)基
Ø 促生長(zhǎng)能力+指示特性的檢查
接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板中。
Ø 適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。
8 注意事項(xiàng)
8.1 培養(yǎng)基的配制方法和滅菌程序發(fā)生變更時(shí)，應(yīng)再次對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。
8.2 培養(yǎng)基批號(hào)發(fā)生變更時(shí)，應(yīng)再次對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。
8.3 培養(yǎng)基供應(yīng)商發(fā)生變更時(shí)，應(yīng)再次對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。
9 記錄
每一次進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查后在《培養(yǎng)基適應(yīng)性驗(yàn)證記錄》上記錄。
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