問題一、不同培養(yǎng)基的滅菌條件不一致,是否可以合并成一個(gè)滅菌條件?
答:培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基滅菌條件常見有三種,如下表1,如果沒有遵從如下滅菌條件,可能會(huì)導(dǎo)致最后的培養(yǎng)結(jié)果有偏離。
表1常見微生物培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基
問題二、在實(shí)際工作中,由于一些原因?qū)е挛⑸锱囵B(yǎng)時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間不一致,培養(yǎng)結(jié)果是否可以接受?
答:同樣依據(jù)表1,如果培養(yǎng)時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間不一致,如實(shí)際培養(yǎng)時(shí)間多于或少于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的時(shí)間范圍都會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。因?yàn)橐话愕奈⑸镌谝粋(gè)相對穩(wěn)定的環(huán)境中的生長曲線是“S”形,培養(yǎng)時(shí)間多一些或少一些可能會(huì)對試驗(yàn)結(jié)果有重大影響,別人也無法重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果。
問題三、微生物培養(yǎng)箱能否放置在接種室?
答:不能。會(huì)有交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),此外如果接種室是利用臭氧來消毒的話,臭氧會(huì)影響培養(yǎng)箱里面正在培養(yǎng)的微生物。
問題四、霉菌培養(yǎng)箱、細(xì)菌培養(yǎng)箱能否放置在同一個(gè)房間培養(yǎng)?
答:可以。有條件的話可以分不同的房間。
問題五、霉菌和細(xì)菌是否可以用同一個(gè)培養(yǎng)箱培養(yǎng)?(分時(shí)段單獨(dú)培養(yǎng))
答:不可以。通過表2就可知,雖然霉菌培養(yǎng)箱和生化培養(yǎng)箱具備培養(yǎng)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的能力,但是一般的微生物檢測是細(xì)菌、霉菌和酵母同時(shí)進(jìn)行,如果用同一個(gè)培養(yǎng)箱分時(shí)段單獨(dú)培養(yǎng)很難證明試驗(yàn)結(jié)果的有效性;同時(shí),企業(yè)的生產(chǎn)一般是連續(xù)的,導(dǎo)致微生物檢驗(yàn)也是連續(xù)的,一個(gè)培養(yǎng)箱也滿足不了實(shí)際質(zhì)控的要求。
表2三種培養(yǎng)箱的對比
問題六、如何對培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒?
答:培養(yǎng)箱需要定期消毒。一般的消毒劑為75%的酒精;由于培養(yǎng)箱內(nèi)膽材料一般為不銹鋼,所以不適合用次氯酸鈉或苯扎溴銨,因?yàn)檫@些消毒劑對不銹鋼有腐蝕性。
問題七、對于外購的培養(yǎng)基,開瓶之后的可以保存多久?
答:對于外購的培養(yǎng)基,開瓶之后的有效期需要經(jīng)過驗(yàn)證才能確定,一般情況下開瓶之后一年內(nèi)都可以使用。
問題八、滅菌后的培養(yǎng)基的可以保存多久?
答:滅菌后的培養(yǎng)基的有效期同樣也需要驗(yàn)證,一般經(jīng)驗(yàn)為冰箱4℃保存建議一周內(nèi)使用完,室溫保存不超過3天。用來封口的塞子最好是規(guī)格統(tǒng)一的,不然驗(yàn)證就沒有意義。
問題九、可以使用微波爐來溶解培養(yǎng)基嗎?
答:滅菌后的培養(yǎng)基室溫放置一段時(shí)間后會(huì)凝固,使用前需要溶解,通常采用水浴的方式。使用微波爐也可以,不過需要驗(yàn)證。
問題十、培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的培養(yǎng)皿是正著放置還是倒著?
答:培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的培養(yǎng)皿需倒扣,第一有利于微生物向上吸收營養(yǎng)物質(zhì),第二避免培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水污染微生物。但新國標(biāo)要求霉菌檢測的平皿是需要正置培養(yǎng)的。
問題十一、什么時(shí)候需要做空白對照和陽性對照?
答:微生物試驗(yàn)都要求做空白對照;但是不同的參考標(biāo)準(zhǔn)對陽性對照規(guī)定不一樣,中國藥典規(guī)定需要做陽性對照,美國藥典、歐洲藥典和日本藥典沒有強(qiáng)制規(guī)定。
問題十二、一般的微生物檢驗(yàn)室需要生物安全柜嗎?
答:不一定。微生物檢驗(yàn)室的分類及所需的主要設(shè)備,如表3。
表3微生物檢驗(yàn)室的分類及所需的主要設(shè)備
問題十三、該怎么選擇合適的生物安全柜?
對于實(shí)驗(yàn)室生物安全柜的安裝及使用,在GB 50346-2011《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》中有很詳細(xì)的說明,表4為生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則。為了更多的了解生物安全柜的知識,可以閱讀JG 170-2005《生物安全柜》和YY 0569-2011《II級生物安全柜》等資料。
表4生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則