1、能力驗(yàn)證
按照預(yù)先制訂的準(zhǔn)則,通過實(shí)驗(yàn)室間比對,來評價(jià)參加者的能力。當(dāng)有的量值的溯源尚難實(shí)現(xiàn)或無法實(shí)現(xiàn)時(shí),可利用能力驗(yàn)證來表明測量結(jié)果的可信性。
2、實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證
實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證是利用實(shí)驗(yàn)室間比對來判定實(shí)驗(yàn)室的能力的活動(dòng),也是認(rèn)可機(jī)構(gòu)加入和維持國際相互承認(rèn)協(xié)議(MRA)的必要條件之一。
二、能力驗(yàn)證樣品接收及準(zhǔn)備
1、操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書,關(guān)鍵是小的備注要注意,很多特殊情況的處理大都在備注里。
2、樣品接收前的檢查很重要,首先對樣品的完整性進(jìn)行檢查,對信息的閱讀要全面,如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時(shí)溝通,這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來的要及時(shí),能節(jié)省不少的時(shí)間;
3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位,很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書,作業(yè)指導(dǎo)書中往往會對本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定,熟讀這些對試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位,有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉,如果寄樣時(shí)在看見可就完了。
4、測試前的準(zhǔn)備工作一定要做好,包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等,有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測試,這樣會將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。
三、能力驗(yàn)證樣品預(yù)處理
1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝,再加入剩余水量,混勻后滅菌或分裝。
2、混菌法倒皿要充分混勻。
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢,目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染),找較水平位置冷卻凝固。
3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動(dòng),造成片狀生長,無法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對于不運(yùn)動(dòng)的菌,可以不覆蓋,對于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。
總結(jié)一下:
a長期檢測同一種樣品,不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象,不覆蓋;長期檢測蔓延選擇了覆蓋,一直覆蓋。
b未知樣品,進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對實(shí)驗(yàn),然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。
c能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),覆蓋和不覆蓋的都做,不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材,畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室(是室而不是人!)能力的綜合體現(xiàn)。
4、培養(yǎng)過程防止平皿干燥。
培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基可以倒的適當(dāng)厚一些,比如25mL。培養(yǎng)箱底部接一個(gè)不銹鋼盆,裝上足量無菌水。
5、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程勤觀察。
微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí),要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況,比如溫度是否穩(wěn)定,培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等,多思多看,準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過程,原始記錄要包含時(shí)間、試驗(yàn)現(xiàn)象、試驗(yàn)結(jié)果三個(gè)要素,方便試驗(yàn)出現(xiàn)問題的查找。
四、實(shí)驗(yàn)過程一定要做陰陽對照
陽性對照,是在試驗(yàn)中,檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合,如果在實(shí)驗(yàn)中,陽性實(shí)驗(yàn)沒有生長的話,那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對照主要是檢測培養(yǎng)基是否污染,在沒有加入任何東西培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會顯示陽性結(jié)果,這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底,染菌了,這樣也會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。
五、培養(yǎng)基方面需要注意的地方
1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝,再加入剩余水量,混勻后滅菌或分裝。
一定要用震蕩器充分混勻水化液,作為檢測原液,普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液,計(jì)數(shù)結(jié)果相差較大;靹蚝蟮臉悠穱(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行檢驗(yàn)。
2、混菌法倒皿要充分混勻。
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢,目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染),找較水平位置冷卻凝固。
3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動(dòng),造成片狀生長,無法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對于不運(yùn)動(dòng)的菌,可以不覆蓋,對于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。
總結(jié)一下:
a 長期檢測同一種樣品,不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象,不覆蓋;長期檢測蔓延選擇了覆蓋,一直覆蓋。
b 未知樣品,進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對實(shí)驗(yàn),然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。
c 能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),覆蓋和不覆蓋的都做,不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材,畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室(是室而不是人!)能力的綜合體現(xiàn)。
4、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程勤觀察。
微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí),要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況,比如溫度是否穩(wěn)定,培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等,多思多看,準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過程,原始記錄要包含檢測時(shí)間、檢測現(xiàn)象、檢測結(jié)果三個(gè)要素,方便檢測出現(xiàn)問題的溯源。
六、結(jié)果判定
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作,但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會因?yàn)槿藛T的差別而會有不同的偏差,這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪,這樣的話會減少很多不必要的錯(cuò)誤。